微管多聚抑制劑(BNC105)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-NTN/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)生長(zhǎng)因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Goat Anti-mouse IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗小鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
細(xì)胞間粘附分子-2抗體 Anti-ICAM-2/CD102 0.2ml
Goat

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）,。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：            

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán)。

黑木耳Pseudomonas stutzeri

產(chǎn)棒桿菌Pseudomonas stutzeri

釀酒酵母Ralstonia eutropha

淺白隱球酵母Pseudomonas putida

微孢毛霉Pseudomonas nitroreducens

米根霉Pseudomonas oryzihabitans

弗雷德里克斯堡假單胞菌Burkholderia pyrrocinia

微白黃鏈霉菌Pseudomonas pseudoalcaligenes

乳酒假絲酵母Pseudomonas syringae

深紅紅螺菌*Ralstonia eutropha

平臍蠕孢菌Pseudomonas fluorescens

RufibacterBurkholderia pyrrocinia

沖擊地土地桿菌Pseudomonas corrugata

薏苡鏈格孢Pseudomonas lundensis

球形賴芽孢桿菌Achromobacter xylosoxidans

產(chǎn)單核李氏桿菌Burkholderia vietnamiensis

花津?yàn)┭挎邨U菌Bacillus│hwajinpoensis 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

畢赤酵母屬Pichiasp. 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

#ST0-2（大球蓋菇）Stropharia│rugosoannulata Farl. ex Murrill 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品
微管多聚抑制劑(BNC105)SRRM2 英文名稱： 絲酸/精酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白2抗體 0.1ml

phospho-EGFR (Tyr1016) 英文名稱： 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 0.1ml

樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細(xì)胞粘附分子樣蛋白抗體 Anti-OPCML 1ml

Anti-Phospho-SMC1 (Ser360) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2B (Tyr1336) 磷酸化谷氨酸受體2B抗體 規(guī)格 0.1ml

c-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg