公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PKM2抑制劑(PKM2-IN-1)
英文名稱:PKM2-IN-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
PKM2-IN-1是一種酮酸激酶M2(PKM2)抑制劑,,其IC50值為2.95μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:94164-88-2 純度:98.35% 分子量:345.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
小鼠脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)ELISA試劑盒 ,,英文名: ADIPOR1 ELISA Kit
犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA檢測試劑盒CaninehepatitisBvirussurfaceaigen,HBsAgELISAKit 96T/48T
犬前列腺特異性抗原(PSA)免疫試劑盒 Canine prostate specific aigen,PSA ELISA Kit
英文名稱HumanOncostatinM,,OSMELISAKIT人抑瘤素M(OSM)規(guī)格:96T/48T
純化大鼠腎上腺髓質(zhì)素(AM)基因重組表達(dá)載體(pcDNA-AM)10微克
RatHighdensitylipoprotein,HDLELISA試劑盒大鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-12/P70 ELISA Kit
魚類三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA檢測試劑盒Fishi-iodothyronine,T3ELISAKit 96T/48T
人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)免疫試劑盒 Human 1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPG ELISA Kit
英文名稱MouseCCL22ELISAKit小鼠CCL22規(guī)格:96T/48T
冰凍切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒50次
RatEpidermalgrowthfactor,EGFELISA試劑盒大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬角化細(xì)胞生長因子(KGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human collagenase I (Collagenase I) ELISA Kit 人膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒
PorcineOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAlpha-SYN(HumanAlpha-Synuclein)ELISAKit人α突觸核蛋白規(guī)格:48T/96T
血液肌酐(CREATININE)化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次
PlaVitaminA,VAELISAKit植物維A(VA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PKM2抑制劑(PKM2-IN-1)phospho-Smad3 (Ser204) 英文名稱: 磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 0.1ml
Fascin-3 英文名稱: 肌動蛋白結(jié)合蛋白Fascin3抗體 0.1ml
擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 Anti-Metal ion transporter 0.2ml
Anti-RRAD/FITC 熒光素標(biāo)記RRAD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PI3K p85/PIK3R1(Tyr368) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
SP (Substance P) P物質(zhì)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg