c-Raf抑制劑(GW 5074)公司*的產(chǎn)品：15-LO/LOX ELISA Kit 大鼠15脂加氧1-萘鹽鹽 AR
Tn- I ELISA Kit 大鼠肌鈣蛋白Ⅰ中性紅 for cell culture,≥90%（HPLC)
SAA ELISA Kit 大鼠血清淀粉樣蛋白A中性紅 indicator (pH 6.8-8.0)
Hpt/HP ELISA Kit 大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究,；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：c-Raf抑制劑(GW 5074)

英文名稱：GW 5074

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二,、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí),，使MTT 還原為甲臜,。

6、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8,、結(jié)果分析

a,、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無(wú)細(xì)胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值,，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

彎梗根霉絲/蘇激受體相關(guān)蛋白抗體Anti-LSM5 Antibody神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)

擬青霉線粒體輔色C還原核心蛋白2抗體Anti-LRTOMT Antibody神經(jīng)束蛋白(NFASC)

短密青霉未分化胚胎干轉(zhuǎn)錄因子1抗體Anti-LSM7 Antibody神經(jīng)上皮轉(zhuǎn)化基因1(NET1)

黑曲霉尾加壓2抗體Anti-LTA Antibody神經(jīng)軟骨蛋白(NCDN)

麥芽糖假絲酵母尾加壓2相關(guān)肽抗體Anti-LSM8 Antibody神經(jīng)連接蛋白3(NLGN3)

皺孢鏈霉菌荊豆凝集1抗體Anti-LTA Antibody神經(jīng)連接蛋白2(NLGN2)

普通變形桿菌泛相關(guān)蛋白1抗體（鼻咽癌相關(guān)基因20蛋白）Anti-LTBR Antibody神經(jīng)連接蛋白1(NLGN1)

哈茨木霉廣泛表達(dá)轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體Anti-LTF Antibody神經(jīng)顆粒(NRGN)

紫紅曲霉泛D抗體Anti-LTK Antibody神經(jīng)介U(NMU)

環(huán)帶擬盤多毛孢珠蛋白抗體Anti-LUM Antibody神經(jīng)介S(NMS)

桔青霉尿卟啉原脫羧抗體Anti-LUM Antibody神經(jīng)介N(NMN)

嗜松青霉磷化信號(hào)淋巴活化分子CD150抗體Anti-LUM Antibody(PB0701)神經(jīng)介B(NMB)

薄花邊傘2-1泛激活2B抗體Anti-LY6A Antibody神經(jīng)膠質(zhì)蛋白(GLDN)

擴(kuò)展青霉ATP-依賴的RNA解旋p47抗體Anti-LYN Antibody神經(jīng)降壓受體2(NTSR2)

鐮刀菌等上游激因子1抗體Anti-LY6C Antibody神經(jīng)激肽A(NKA)

串珠鐮刀菌*泛化組蛋白H2AX抗體Anti-LYZ Antibody神經(jīng)鈣黏蛋白(CDH2)

中斷位點(diǎn)蛋白STIL抗體水生異常球菌大鼠子宮頸上皮細(xì)胞

紡錘體組裝異常蛋白6抗體毛霉屬（斜面）大鼠子宮平滑肌細(xì)胞

減數(shù)分裂重組蛋白SPO11抗體殺鮭氣單胞菌大鼠卵巢上皮細(xì)胞

Smad蛋白E3泛連接1抗體梭形芽孢桿菌大鼠子宮成纖維細(xì)胞
c-Raf抑制劑(GW 5074)短小芽孢桿 碳酸鋇補(bǔ)體蛋白3Elisa

香栓孔 三氧化銻補(bǔ)體蛋白4Elisa

構(gòu)巢曲霉 N-乙酰苯肼超敏C反應(yīng)蛋白Elisa

煙色血革 硫酸鈦超氧化物歧化Elisa

硬結(jié)節(jié)桿 硫酸鈰垂體腺苷酸環(huán)化激活肽Elisa

桔橙鏈霉 氧化鋯雌二Elisa

黃曲霉 鉛粉雌Elisa

巴氏醋桿 十一烯酸雌受體Elisa

大腸埃希 草酸促甲狀腺Elisa

發(fā)酵乳桿* 硬脂酸鋅促甲狀腺釋放Elisa

葡萄座腔 乙酸鋅促卵泡Elisa

氧化節(jié)桿 磷酸二氫鋅促腎上皮質(zhì)釋放Elisa

白色假絲酵母 磷酸鋅促腎上腺皮質(zhì)Elisa

植物乳桿 堿式碳酸鋅促性腺釋放Elisa

膠孢 氧化鋅催產(chǎn)Elisa