PI3K/mTOR/DNA-PK抑制劑(LY3023414)公司正在出售的產(chǎn)品：Polycystin 2(polycystic kidney disease 2) 多囊腎蛋白2抗體 for HPLC,≥98%
phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide 化蛋白激B抗原（絲氨化位點：473） ACS,88%
RKIP(Raf kinase inhibitor pr

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。

Pseudomonas核膜糖蛋白210抗體Human TRIM25 ELISA Kit大鼠褪黑(MT)免疫試劑盒

慶豐鏈霉菌GADD153抗體Human TRIM24 ELISA Kit大鼠突觸體/突觸(Syp/SYN)免疫試劑盒

Rummeliibacillus stabekisiiG蛋白偶聯(lián)受體57抗體Human TRIM29 ELISA Kit大鼠突觸蛋白1(Syn1)免疫試劑盒

黑木耳GSK-3結(jié)合蛋白FRAT2抗體Human TRIM27 ELISA Kit大鼠透明質(zhì)1(HYAL1)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷化內(nèi)收蛋白gamma抗體Human DDO(D-aspartate oxidase) ELISA Kit大鼠透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)免疫試劑盒

華根霉生長因子受體結(jié)合適應(yīng)蛋白抗體Human TRIM31 ELISA Kit大鼠透明質(zhì)(HA)免疫試劑盒

金黃色葡萄球菌*GARNL3蛋白抗體Human TRERF1 ELISA Kit大鼠銅藍(lán)蛋白(CP)免疫試劑盒

杏鮑菇Tuberin樣蛋白1抗體Human TRIB2 ELISA Kit大鼠同型半胱(Hcy)免疫試劑盒

銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)X連鎖Charcot-Marie-Tooth變相關(guān)蛋白抗體Human TRIM11 ELISA Kit大鼠鐵蛋白(FE)免疫試劑盒

乳菌計數(shù)質(zhì)控樣品甘酰核苷合成抗體Human SRSF3(Serine/arginine-rich splicing factor 3) ELISA Kit大鼠天門冬基轉(zhuǎn)移(AST)免疫試劑盒

卷枝毛霉卷枝變型生長休止特定蛋白2抗體Human TRIM15 ELISA Kit大鼠糖原磷化同工MM(GP-MM)免疫試劑盒

棲土曲霉G蛋白γ11/Gγ11 抗體Human TRIM14 ELISA Kit大鼠糖原磷化同工BB(GP-BB)免疫試劑盒

白假絲酵母磷化肌動蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體Human TRIM17 ELISA Kit大鼠糖原磷化(GP)免疫試劑盒

芽孢桿菌屬γ-谷酰轉(zhuǎn)肽7重鏈抗體Human TRIM23 ELISA Kit大鼠糖原合成激3α(GSK3A)免疫試劑盒

炭疽芽胞桿菌生長激2/胎盤特異性生長激抗體Human TRIM2 ELISA Kit大鼠糖原合成激(GSK)免疫試劑盒

拜氏梭菌高爾基體相關(guān)蛋白GM130抗體Human TRIM25 ELISA Kit大鼠糖原合成免疫試劑盒

死亡谷芽孢桿菌Bacillus│vallismortis 質(zhì)量規(guī)格：CP木蝴蝶苷A

茯苓Wolfiporia│extensa (Peck) Ginns 質(zhì)量規(guī)格：325(44um)西貝母堿

膠孢刺盤孢Colletotrichum│gloeosporioides 質(zhì)量規(guī)格：1250(11um)黃獨B
PI3K/mTOR/DNA-PK抑制劑(LY3023414)大腸埃希 硫酸卷曲霉谷氨酸脫羧Elisa

癭青霉 Fmoc-N-甲基-L-異亮氨酸休克蛋白70Elisa

膜醭假絲酵母 四金酸銨 水合物谷氨酸脫羧Elisa

香菇 Fmoc-3-(2-萘基)-D-氨酸精氨酸激Elisa

芽孢桿 四金酸鈉 二水合物總蛋白Elisa

白色類諾卡氏 2-基苯酸環(huán)磷酸腺苷Elisa

冷桿 (R,R)-DACH-苯基 Trost 配體葡萄糖-6-磷酸脫氫Elisa

棘抱曲霉 六銠(III)酸鄰苯二甲酸二丁酯Elisa

氨桿 4-頻哪酯磷脂酰Elisa

鹽索氏 硫酸鋱(III) 八水合物己糖Elisa

植物乳桿 N-乙酸-3-甲線粒體呼吸鏈復(fù)合物IElisa

產(chǎn)氣莢膜梭       C型 Irbesartansirt1去乙?；疎lisa

類布氏乳桿 DL-高瓜氨酸煙酰腺嘌呤二核苷酸Elisa

球孢白僵 四溴鈀酸狀腺原氨酸Elisa

土壤球 溴化鈥(III)甲狀腺Elisa