DNA合成抑制劑（Nelarabine）公司正在出售的產(chǎn)品：CASP4/FITC 熒光標(biāo)記半胱蛋白蛋白-4抗體IgG4-硝肉桂 98%
Caspase-8 /FITC 熒光標(biāo)記半胱氨蛋白8抗體IgG3,4,5-氧肉桂 99%
FLASH/CASP8AP2/FITC 熒光標(biāo)記半胱氨蛋白8相關(guān)蛋白2抗體IgG2,3,4-氧肉桂 97%
Caspase-9/FITC 熒光標(biāo)記白介1-β轉(zhuǎn)化樣凋亡

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。
阪崎腸桿菌P73腫瘤抑制基因抗原Anti-DIRAS1 Antibody人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)

苜蓿中華根瘤菌p70S6Kb抗原Anti-DLC1 Antibody人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)

*擬蛹蟲草癌易感基因相關(guān)蛋白2Anti-DIO3 Antibody人CD30分子(CD30)

洋蔥伯克霍爾德菌血小板活化因子受體抗原Anti-DKC1 Antibody人CD30分子(CD30)

谷棒桿菌 磷化p21激活激4多肽抗原Anti-DLEC1 Antibody人CXC趨化因子受體1(CXCR1)

鐮刀菌激活激PAK7/PAK5抗原Anti-DLG2 Antibody人CXC趨化因子受體1(CXCR1)

海膽橙色小單孢菌蛋白激活受體-1抗原Anti-DLEU7 Antibody人XC趨化因子受體1(XCR1)

土壤短波單胞菌蛋白激活受體-2抗原Anti-DLGAP1 Antibody人XC趨化因子受體1(XCR1)

瓦尼針層孔菌蛋白活化受體4/前列腺凋亡反應(yīng)蛋白4抗原Anti-DLGAP5 Antibody人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)

大腸埃希氏菌多腺苷二磷多聚抗原(N端)Anti-DLGAP5 Antibody人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)

南方菌寄生菌配對盒基因8抗原Anti-DLL4 Antibody人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)

德干高原鏈霉菌配對盒基因9抗原Anti-DLX3 Antibody人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)

鐮孢屬P-鈣粘附分子抗原Anti-DLK1 Antibody人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)

Herbaspirillum肝腸鈣粘連蛋白抗原Anti-DMAC2L Antibody人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)

阿魏側(cè)耳凋亡相關(guān)蛋白4抗原Anti-DLX4 Antibody人白活化黏附因子(ALCAM)

膠孢凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗原Anti-DMC1 Antibody人白活化黏附因子(ALCAM)

磷化蛋白激CT500抗體淡紫色擬青霉人胚腎上皮細(xì)胞

p21活化蛋白激ARHG7抗體光孢短柄帚霉人乳腺癌細(xì)胞(耐阿霉)

血小板源性生長因子受體β樣蛋白抗體香蕉炭疽盤長孢菌人食管癌細(xì)胞

抑癌蛋白DLP1抗體許旺酵母小鼠淋巴瘤細(xì)胞
DNA合成抑制劑（Nelarabine）瓊斯氏 Schleicheol 2

赤紅球 三裂尾草（供應(yīng)商少）

多殺性巴氏桿 藜蘆

施氏假單胞 芝麻

Sphingomonas 對乙?；交酋?/span>

金色鏈霉 對氨基甲酯

大腸埃希 柳匍匐次苷

芽孢桿屬 Rutaretin

附球狀暗殼孢 葉含乙酰癭花香茶菜 B

黑森新鞘氨 連翹酸

產(chǎn)二鏈霉 槲皮3-O-洋槐糖苷

污泥枝動(dòng) Quercetin 3,4'-dimethyl ether

泡盛曲霉 O-beta-D-吡喃葡萄糖苷對乙烯基苯酯

 臭靈丹酸

蟬花* Patoside B