平滑肌細(xì)胞遷移和增殖抑制劑(TAS-301)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-p90RSK/FITC 熒光素標(biāo)記絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-SRC3/KAT13B/AIB1/FITC 熒光素標(biāo)記類固醇受體輔助活化因子-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus ant

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán)。
L-甘(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Voriconazole周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝50mg

L-谷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Vorinostat/SAHA膽固25羥化抗體包裝1g

L-谷酰(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Vorinostat/SAHA天冬-胱特異性蛋白家族抗體包裝5g

L-胱（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Argireline Acetate鈣營養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8抗體包裝1g

L-核糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Levothyroxine鈣結(jié)合蛋白5/3抗體包裝250mg

L-硫(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： AdenineCD98輕鏈抗體包裝1g

L-狀腺(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Adenine胰輔脂抗體包裝5g

L-狀腺鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Erythromycin ethylsuccinate17號染色體開放閱讀框104抗體包裝100MG

L-精(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ibuprofen和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄蛋白抗體包裝1g

L-賴（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ibuprofen富半胱肝結(jié)合蛋白61抗體包裝250MG

L-酪(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Enalapril Maleate2號染色體開放閱讀框65抗體包裝1g

L-亮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Enalapril Maleateβ連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體包裝5g

L-羥基脯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 5-Fluorouracil陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控樣蛋白1抗體包裝1g

L-乳(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 5-FluorouracilDNA斷裂因子相似蛋白A抗體包裝5g

L-色(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sumatriptan succinate DNA斷裂因子相似蛋白B抗體包裝1g

: =NBRC105666資源名稱: 西北奇異球菌 質(zhì)量規(guī)格：>95%血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白試劑盒血竭高鹽;Dracohodin p

: ivcas7.00975資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%血清/糖皮質(zhì)激調(diào)節(jié)激2試劑盒9-硝基喜樹堿;9-Nitrocampt

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血漿抗凝蛋白S試劑盒新補(bǔ)骨脂異黃;Neobavaisofl
平滑肌細(xì)胞遷移和增殖抑制劑(TAS-301)纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白43抗體短葶山麥冬皂苷C（標(biāo)準(zhǔn)品） Cinepazide maleate

纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白80抗體短葉松(標(biāo)準(zhǔn)品) Cinepazide maleate

CD101抗體斷血流皂苷A（標(biāo)準(zhǔn)品） Sodium sulfadiazine(SD-Na)

免疫球蛋白超家族成員5抗體對氧 Sodium sulfadiazine(SD-Na)

alpha干擾誘導(dǎo)蛋白27樣蛋白2抗體對羥(標(biāo)準(zhǔn)品) 4,4-Diethoxybutylamine

胰島抗體對香豆;對羥肉桂(標(biāo)準(zhǔn)品) 4-Isopropoxyethoxymethylphenol

對葉百部（標(biāo)準(zhǔn)品） AVL-292

中間絲家族孤啡肽2蛋白抗體對葉百部三鹽 5-Methylnicotinic acid

CD339抗體盾葉薯蕷（標(biāo)準(zhǔn)品） 5-Fluoroindole-2-carboxylic acid