以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
IDO1抑制劑(IDO5L) | IDO5L | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
商品介紹:
IDO-IN-2是一種有效的IDO1抑制劑,,作用于Hela細胞,IC50為19nM,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:914471-09-3 純度:99.29% 分子量:271.64 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水),。
2) 對于懸浮細胞,,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,,胰酶消化時間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,,將細胞輕輕吹打下來,,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞,。
3) 收集細胞后,,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,,使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標,。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光,。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞,,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
紅曲霉UBXN2B蛋白抗體Anti-LAMP1 Antibody生長激促分泌受體(GHSR)
疣孢馬杜拉放線菌上調基因4抗體(N端)Anti-LASP1 Antibody生長激2(GH2)
米根霉泛蛋白抗體Anti-LAT Antibody生長關聯(lián)蛋白43(GAP43)
洋蔥曲霉泛特異性蛋白28抗體Anti-LAYN Antibody生長分化因子9(GDF9)
節(jié)桿菌尿激型纖溶原激活因子抗體Anti-LATS1 Antibody生長分化因子5(GDF5)
翹鱗傘尿鹽重吸收轉運子1抗體Anti-LAT2 Antibody生長分化因子3(GDF3)
熱帶假絲酵母14號染色體開放閱讀框130抗體Anti-LBP Antibody生長分化因子11(GDF11)
棒桿菌屬去泛化3抗體Anti-LBR Antibody生長分化因子1(GDF1)
巴西果小克銀漢霉突觸囊泡融合蛋白Unc18-3抗體Anti-LBP Antibody生物酰(BTD)
片球菌屬泛蛋白連接E3α2抗體Anti-LCAT Antibody生精蛋白Ⅱ(SEMG2)
水管致黑棲熱菌腫瘤抑制基因UVRAG抗體Anti-LCAT Antibody生精蛋白Ⅰ(SEMG1)
爪哇青霉泛結合UFC1抗體Anti-LBP Antibody生肌因子6(MYF6)
紫色紅曲泛結合E2J1抗體Anti-LCAT Antibody生肌因子5(MYF5)
大腸埃希氏菌輔色C還原核心蛋白1抗體Anti-LCN1 Antibody滲透性糖蛋白(Pgp)
釀酒酵母核蛋白95抗體Anti-LCN2 Antibody滲出性玻璃體視網(wǎng)膜病變基因2(EVR2)
芽孢八疊球菌屬泛結合E2變異體1抗體Anti-LCK Antibody腎足蛋白(NPHN)
新型血小板相關血管內皮分泌蛋白SCUBE1抗體淋病奈瑟菌大鼠血管內皮細胞
應激誘導分泌蛋白1抗體層出鐮刀菌(斜面)大鼠腸微血管內皮細胞
抗腫瘤蛋白ANUP抗體淡紫色擬青霉(斜面)大鼠主動脈平滑肌細胞
琥珀亞基B560抗體層出鐮刀菌大鼠大隱靜脈內皮細胞
IDO1抑制劑(IDO5L)膜醭畢赤酵母 鋁,、砷,、、鋇,、鈹,、鉍、鈣,、鎘,、鈷、鉻,、銫,、銅、鐵,、汞,、、鋰,、鎂,、錳、鈉,、鎳,、鉛、銣,、硒,、鋅、釩/低氧誘導因子-1αElisa
硬皮地星 鋁,、砷,、、鋇,、鈹,、鉍、鈣,、鎘,、鈷、鉻,、銅,、鐵、,、鋰,、鎂,、錳、鉬,、鈉,、鎳、鉛,、銻,、硒、鍶,、鈦,、、α干擾Elisa
蠟蚧 鋁,、砷,、鋇、鈹,、鉍,、鈣、鈰,、鎘,、鈷、鉻,、銅,、鐵、鎵,、汞,、銦、,、鋰,、鎂、錳,、鈉,、鎳、鉛,、釕,、硒、鍶,、S轉移Elisa
白色短波單胞 鋁,、砷、,、鋇,、鉍,、鈣、鎘,、鈷、鉻,、銅,、鐵、鎵,、汞,、銦、,、鎂,、錳、鉬,、鈉,、鎳、鉛,、銻,、鈧、硒,、鍶,、尿苷二磷酸葡萄糖酸轉移Elisa
楊盤二孢(都不提供) 鋁、砷,、,、鋇、鈹,、鉍,、鈣、鎘,、鈷,、鉻、銅,、鐵,、鎵、鍺,、汞,、、鋰,、鎂,、錳,、鉬、鎳,、磷,、鉛、鉑,、銣,、磺基轉移Elisa
pBudCE4.1 氨酸甲酯紅霉-N-脫甲基Elisa
大腸埃希氏 砷、鉍,、鎵,、鍺、銦,、鉛,、銻、硒,、錫,,碲、/As, Bi, Ga, Ge, In, Pb, Sb,苯-4羥化Elisa
枯草芽孢桿 鋇,、鈹,、鈰、鈷,、銦,、鋰、鎂,、鉛,、銠、,、釔/Ba, Be, Ce, Co, In, Li, Mg,氨基吡啉-N-脫甲基Elisa
蠟狀芽孢桿 鉍,、鍺、銦,、镥,、銠、鈧,、鋱,、釔/Bi, Ge, In, Lu, Rh, Sc, Tb, Y白斑癥病雙抗體夾心Elisa
高盧蜜環(huán)(可訂購) 鈧、銫,、銦,、銠/Sc, Cs, In, Rh磷脂酰Elisa
靈芝 鉍、鍺,、銦,、銠,、鈧、鋱,、釔/Bi, Ge, In, Rh, Sc, Tb, Y磷脂酰絲氨酸Elisa
海芋平臍蠕孢 砷,、鈹、鎘,、鉻,、鎳、鉛,、硒、/As, Be, Cd, Cr, Ni, Pb, Se, Tl游離脂肪酸Elisa
大毛霉 鋰,、鈉,、、銨,、鎂,、鈣、鍶,、鋇/Li, Na, K, NH4+, Mg, Ca, Sr, BaGTPElisa
熱帶靈芝 氟,、、溴,、硝酸根,、硫酸根/F-, Cl-, Br-, NO3-, SO42-P糖蛋白;滲透性糖蛋白Elisa
腫囊腐霉 鑭、鈰,、鐠,、釹、釤,、銪,、釓、鋱,、鏑,、鈥、鉺,、銩,、鐿、镥,、釔/La, Ce, Pr, Nd, Sm,維生CElisa