商品介紹:
TG003是高效的Clk1/Sty抑制劑,抑制Clk1和Clk4的IC50值分別為20和15nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):719277-26-6 純度:99.00% 分子量:249.33 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Clk1/Sty抑制劑(TG003) | TG003 | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
3) 收集細(xì)胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)),。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),,PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
氣單胞菌人CD4分子Anti-NEK5 Antibody人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)
紅平紅球菌兔骨堿性磷 ELISA 試劑盒Anti-NEK5 Antibody人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)
玫瑰庫(kù)克氏菌人P鈣黏蛋白/胎盤(pán)鈣黏蛋白Anti-NEK9 Antibody人低密度脂蛋白(LDL)
薄層菌屬小鼠粘蛋白/粘液5ACAnti-NEMF Antibody人低密度脂蛋白(LDL)
醬油曲霉大鼠乙酰酯Anti-NEU2 Antibody人花生四烯(AA)
黑布施泰因芽孢桿菌兔骨鈣 Anti-NEURL2 Antibody人花生四烯(AA)
地霉雙足囊菌大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白Anti-NEURL1 Antibody人骨涎蛋白(BSP)
毛頭鬼傘(雞腿菇)人角化生長(zhǎng)因子Anti-NEMF Antibody人骨涎蛋白(BSP)
Idiomarina woesei小鼠血管緊張轉(zhuǎn)化Anti-Nestin Antibody人骨堿性磷(BALP)
脲放線(xiàn)桿菌人血小板衍生生長(zhǎng)因子BBAnti-NEUROD2 Antibody人骨堿性磷(BALP)
大洋芽孢桿菌小鼠血管緊張ⅡAnti-NF1 Antibody人環(huán)磷酰(CTX)
葉片微桿菌大鼠總膽汁Anti-NF-Y Antibody人環(huán)磷酰(CTX)
嗜熱脂肪地芽孢桿菌大鼠β2微球蛋白Anti-Neuronal Calcium Sensor 1 Antibody人1,3-二磷甘油(1,3-DPG)
根霉小鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物抗體Anti-NFATC3 Antibody人1,3-二磷甘油(1,3-DPG)
嗜熱鏈球菌人CXC趨化因子配體16Anti-NFE4 Antibody人1,5-脫水葡萄糖/1,5-脫水山梨(1,5-AG)
土地芽孢桿菌大鼠視黃結(jié)合蛋白Anti-NFAT5 Antibody人1,5-脫水葡萄糖/1,5-脫水山梨(1,5-AG)
環(huán)指蛋白23抗體麗胡枝子根瘤菌小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞
環(huán)指蛋白24抗體毛胡枝子根瘤菌人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞
環(huán)指蛋白25抗體葛藤根瘤菌人甲狀腺鱗癌細(xì)胞
環(huán)指蛋白31抗體禾草離蠕孢人咽鱗癌細(xì)胞
Clk1/Sty抑制劑(TG003)白假絲酵母 亞硫酸
釀酒酵母 化
腸球?qū)?/span>
小腸腸球 酸
大隱球酵母 碳酸氫
水井坊氨基酸桿 硫酸鋁
弗雷德里克斯堡假單胞 草酸
釀酒酵母 硫酸亞鐵
茄類(lèi)鐮刀 硫酸鐵
榴紅鏈霉 檸檬酸
Marisediminicola 磷酸
四脊曲霉 磷酸烯酮酸單環(huán)己鹽
塔賓曲霉 鉬酸
海洋桿 四正丁基化
黑曲霉 四正丁基化