公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:甲基轉(zhuǎn)移酶SETD7抑制劑(PFI-2鹽酸鹽)
英文名稱:PFI-2 hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
PFI-2鹽酸鹽是甲基轉(zhuǎn)移酶SETD7高效選擇性抑制劑,,IC50值為2nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1627607-87-7 別名:(R)-PFI-2 hydrochloride 純度:98.60% 分子量:535.98 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
華盛頓腥擲孢菌血小板衍化生長(zhǎng)因子γ抗體Anti-AK2 Antibody(PB1089)存活抗體/生存蛋白(Surv)
運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單孢菌(現(xiàn)1)血小板47蛋白抗體Anti-AKAP12 Antibody脆性組三聯(lián)體(FHIT)
虎掌菌*相關(guān)血漿蛋白A2抗體Anti-AK1 Antibody催乳誘導(dǎo)蛋白(PIP)
水鹽單胞菌屬血漿谷羧肽抗體Anti-AKR1C1/C2 Antibody催乳抑制激(PIH)
殼菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-AKR1B10 Antibody催乳釋放激(PRH)
弗吉尼亞鏈霉菌撲克蒙蛋白抗體Anti-AKR1B1 Antibody催乳(PRL)
粟酒裂殖酵母癌易感基因相關(guān)蛋白2Anti-AKR1D1 Antibody催產(chǎn)受體(OXTR)
多主葡萄殼菌細(xì)小清蛋白抗體Anti-AKR1D1 Antibody催產(chǎn)(OT)
灰葡萄孢(灰霉病菌)脂酰肌聚糖A抗體Anti-AKT1 Antibody促有絲分裂因子(MF/MPF)
Havobacterium原鈣粘蛋白11抗體Anti-AKR7A2 Antibody促胰液/胰泌(Secretin)
綠色木霉P選擇糖蛋白配體1抗體Anti-AKT2 Antibody(PB0006)促胰液/分泌受體(SR)
秸稈色假單胞菌蛋白激N2抗體Anti-AKT2 Antibody促胰液(secretin)
黃白側(cè)耳G蛋白偶合受體激2抗體Anti-Alas1 Antibody促性腺激釋放激(GnRH)
釀酒酵母早期發(fā)育調(diào)控蛋白2抗體Anti-ALDH1A1 Antibody促?;鞍?ASP)
克魯弗酵母磷酯Cβ3Anti-ALCAM Antibody促胃液受體(GsaR)
污黑腐皮殼血小板源性生長(zhǎng)因子A抗體Anti-ALDH18A1 Antibody促睡眠肽(DSIP)
無害李斯特菌Listeria│innocua 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
乳桿菌屬Lactobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
斯魯菲亞紅酵母Rhodotorula│slooffiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
甲基轉(zhuǎn)移酶SETD7抑制劑(PFI-2鹽酸鹽)地衣芽孢桿 三(2-噻吩基)膦胱抑Elisa
球孢白僵 煌綠乳糖膽鹽肉湯BGLB(含小倒管)骨蛋白Elisa
檸檬色節(jié)桿 煌綠乳糖膽鹽肉湯BGLB(含小倒管)輪狀病抗體Elisa
滑假絲酵母 EC肉湯(含小倒管)仙臺(tái)病抗體Elisa
釀酒酵母 N-(2-氨乙基)甘氨酸印度猬因子Elisa
納什維爾鏈霉 LST-MUG信號(hào)3AElisa
雜色曲霉 LST發(fā)酵管(含小倒管)圓環(huán)病2型Elisa
耐寒短桿 三糖鐵管蛋白聚糖Elisa
羊肚 改良EC(mEC+n)肉湯白介5Elisa
綠色木霉 2-叔丁基對(duì)甲酚I型膠原蛋白Elisa
牛絲膜 改良EC(mEC+n)肉湯總膠原Elisa
辣椒溶桿 磷酸鹽緩沖液(PBSpH7.2)白介21Elisa
鏈格孢 營(yíng)養(yǎng)瓊脂(水質(zhì)監(jiān)測(cè))白介20 Elisa
溜曲霉 異硫基乙酸乙酯白介22Elisa
*灰葡萄孢 D-環(huán)絲氨酸溶液AKT蛋白Elisa