Hsp90抑制劑（NVP-HSP990）公司*的產(chǎn)品：M30(Mouse Embryonic Stem MESPU30) ELISA Kit 小鼠胚胎干系MESPU30硫聯(lián)氨 CP,98.0%
NF-κB p65(Mouse nuclear factor-κB p65) ELISA Kit 小鼠核因子κB亞p65親和肽硫聯(lián)氨 99.99% metals basis
GP- II b II

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Hsp90抑制劑（NVP-HSP990）

英文名稱：NVP-HSP990

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究,；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；

6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

Melanconis PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TBX21 Antibody鈣調(diào)蛋白樣蛋白5(CALML5)

鹽地喜鹽芽孢桿菌生物標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TCF7 Antibody鈣調(diào)蛋白樣蛋白3(CALML3)

異常畢赤酵母PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TBX21 Antibody鈣調(diào)蛋白3(CALM3)

釀酒酵母羅丹明標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TCF7L1 Antibody鈣調(diào)蛋白2(CALM2)

鹿皮色曲霉FITC標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TCP1 Antibody(PB0871)鈣調(diào)蛋白1(CALM1)

膠孢膠體金標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TDRD3 Antibody鈣黏蛋白9(CDH9)

擬莖點(diǎn)霉堿性磷（AP）標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgGAnti-TEC Antibody鈣黏蛋白8(CDH8)

米根霉Cy5標(biāo)記的小鼠抗牛IgGAnti-TEC Antibody鈣黏蛋白7(CDH7)

槐栓菌Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗牛IgGAnti-TECTA Antibody鈣黏蛋白26(CDH26)

松針散斑殼Cy7標(biāo)記的小鼠抗牛IgGAnti-TEK Antibody鈣黏蛋白24(CDH24)

菊池鏈格孢PE標(biāo)記的小鼠抗牛IgGAnti-TEK Antibody鈣黏蛋白23(CDH23)

黑木耳PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗牛IgGAnti-TEK Antibody鈣黏蛋白22(CDH22)

卷曲鏈霉菌PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗牛IgGAnti-TERF2 Antibody鈣黏蛋白20(CDH20)

厚環(huán)粘蓋牛肝菌APC標(biāo)記的小鼠抗牛IgGAnti-TET1 Antibody鈣黏蛋白19(CDH19)

高地芽孢桿菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗牛IgGAnti-TERT Antibody鈣黏蛋白18(CDH18)

土曲霉Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗牛IgGAnti-TERT Antibody鈣黏蛋白12(CDH12)

腫瘤抑制相關(guān)蛋白PHEMX抗體派倫霉屬人直腸組織提取物

4-磷磷脂酰肌5激1樣蛋白抗體榛針孢酵母人支氣管組織提取物

多型性腺瘤基因1蛋白抗體湖南類芽胞桿菌人肺動(dòng)脈組織提取物

細(xì)胞膜鈣ATP1抗體玫瑰黃鞘單胞菌人呼吸道組織提取物
Hsp90抑制劑（NVP-HSP990）枯草芽孢桿 (-)-扁柏脂,，蓽澄茄內(nèi)脂

屎腸球 伏康京堿

灰托柄菇 對(duì)葉百部堿

產(chǎn)馬乳酒乳桿 次甲二氫丹參醌

大腸埃希氏桿 △6-去氫彌羅松酚

芭蕉生粘鞭霉 丹參酚酮

委內(nèi)瑞拉鏈霉 15,16-二氫丹參二 C

香菇 15,16-二氫丹參二 B

Klebsiella pneumoniae Delta 7-avenasterol

栗疫 Delta 5-avenasterol

光滑青霉 靈芝烯酸C

玖紅穗狀霉 靈芝酸T-Q

扣囊復(fù)膜孢酵母 靈芝烯酸A

頂青霉 靈芝酸TR

嗜線蟲致病桿 13-羥基羽扇豆鹼 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜,。

6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻,。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8,、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)