人食管平滑肌原代細胞公司正在銷售的產(chǎn)品：人原代食管平滑肌細胞 人大細胞肺癌細胞 英文名稱： NCI-H460 LCL2 豹貓肺成纖維樣細胞 1ml/T75 人胰島β細胞培養(yǎng)基 100mL 3T3-L1 小鼠胚胎成纖維細胞 小鼠原代腸黏膜上皮細胞

人食管平滑肌原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

 

人食管平滑肌細胞分離自食管組織,；食管可分為頸段、胸段和腹段,，脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,，胸段位于左,、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,，腹段很短與胃相連,。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層,、肌層和外膜,。其中，肌層上1/3段為骨骼肌,，下1/3為平滑肌,，中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中,，肌纖維的排列方式分為內(nèi)環(huán)形和外縱形兩層,。食管的蠕動是由食管平滑肌收縮嚴格控制，食管還有括約肌,，位于環(huán)狀軟骨水平的,，稱為食管上括約肌,；位于食管下端,，一部分在膈上，穿過膈孔,，另一部分在膈下的高壓帶,，稱為食管下括約肌。食管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細胞貼壁伸展,，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形，核卵圓形,、居中,；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富,，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏,；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時,，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的人食管平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人食管平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。

3,、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。

PC-3 人前列腺癌細胞  牦牛皮膚細胞;BMU-S1  EPD5 Others Human 人 EPD5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   SERPINB3C Others Mouse 小鼠 Serpinb3c 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 兔原代淋巴管成纖維細胞 小鼠原代腸肌成纖維細胞

甘丙肽(GAL)重組蛋白 Recombinant Galanin (GAL)

IFNL3 Protein Human 重組人 IFNL3 / IL28B / Interleukin-28B 蛋白

PTPN6重組小鼠 PTPN6 蛋白 (aa 207-597, His & GST 標簽) Protein

FCGR3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD16 / FCGR3 蛋白 (His & AVI 標簽)

SPHK1重組人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

大鼠巨噬細胞來源趨化因子(MDC)試劑盒 ,，英文名： MDC ELISA Kit

Mouse lipoprotein alpha (Lp- alpha) ELISA Kit 小鼠脂蛋白α(Lp-α)試劑盒

Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFN(MouseFibronectin)ELISAKit小鼠纖連蛋白

細胞肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性比色法定量試劑盒25次

RatphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit大鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠釋放激素   英文名稱：   Mouse Gonadoopin-Releasing Hormone   規(guī)格：      英文縮寫：   GH

小鼠葡萄糖氧化酶   英文名稱：   Mouse Glucose Oxidase   規(guī)格：      英文縮寫：   GOD

小鼠胰高血糖素   英文名稱：   Mouse Glucagon   規(guī)格：      英文縮寫：   GC

小鼠葡萄糖60酸脫氫酶   英文名稱：   Mouse Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase   規(guī)格：      英文縮寫：   G6PD

人食管平滑肌原代細胞小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)試劑盒

Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG試劑盒人菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CREG1重組小鼠 CREG / CREG1 蛋白 Protein

睪素2(TIC2)重組蛋白 Recombinant Testican 2 (TIC2)

MAPK12重組人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 蛋白 Protein

CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白

CD200R1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200R / OX2-R 蛋白