商品介紹:
SR9009是一種REV-ERBα/β激動(dòng)劑,,作用于REV-ERBα和REV-ERBβ,IC50分別為670nM和800nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1379686-30-2 純度:98.55% 分子量:437.94 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):REV-ERBα/β激動(dòng)劑(SR9009)
英文名稱(chēng):SR9009
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
球孢白僵菌原鈣粘蛋白γA3抗體Anti-AGER Antibody(PB0530)蛋白 DJ-1(PARK7)
杏鮑菇血小板源性生長(zhǎng)因子BB抗體Anti-AGFG1 Antibody彈性蛋白(Elastase)
枯草芽孢桿菌枯草亞種胰島促進(jìn)因子抗體(胰十二指腸同源異型盒蛋白)Anti-AGO1 Antibody彈性蛋白(ELN)
枝彎孢乙?;?/span>P53(Lys382)抗體Anti-AGO2 Antibody膽(Cholic acid)
圓酵母屬磷化過(guò)氧化活化增生受體γ抗體Anti-AGO4 Antibody膽(CA)
蘋(píng)果輪紋病磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-AGRP Antibody膽囊收縮/縮膽囊八肽(CCK-8)
小單孢菌腺苷環(huán)化激活肽受體1抗體Anti-AGRN Antibody膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)
鼠傷寒沙門(mén)氏菌關(guān)節(jié)炎相關(guān)基因抗體Anti-AGR2 Antibody膽囊收縮(CCK)
栗疫菌血小板活化因子抗體Anti-AGT Antibody轉(zhuǎn)運(yùn)體樣蛋白4(SLC44A4)
假單胞菌蛋白激活受體-1抗體Anti-AHR Antibody乙酰轉(zhuǎn)移(ChAT)
利古里亞游動(dòng)放線菌蛋白激活受體-2抗體Anti-AGT Antibody乙?;?CHAc)
釀酒酵母蛋白活化受體4抗體Anti-AHR Antibody磷甘油酯(PC/CPG)
豬布魯氏菌多腺苷二磷多聚抗體/多聚ADP-核糖聚合1Anti-AGTR1 Antibody膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)
蠟狀芽孢桿菌配對(duì)盒基因3抗體Anti-AHR Antibody膽固7α-羥化(CYP7A)
釀酒酵母配對(duì)盒基因8抗體Anti-AGTR1 Antibody膽固(CH)
貝萊斯芽胞桿菌配對(duì)盒基因9抗體Anti-AHR Antibody單絲蛋白激1(LIMK1)
凍膠假絲酵母Candida│gelidadi 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分
越南芽胞桿菌Bacillus│vietnamensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
糞腸球菌Enterococcus│faecalis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
REV-ERBα/β激動(dòng)劑(SR9009)釀酒酵母 2-乙酰基噻唑白介15Elisa
固氮 2,6-二-4-三氟乳糖Elisa
豇豆慢生根瘤 1,4-丁二二縮水甘油銅藍(lán)蛋白Elisa
松口蘑 代十四烷苯氨酸Elisa
詹氏酸桿 李氏增肉湯(LB1)溶血磷脂酰Elisa
棲砂桿 李氏增肉湯(LB2)維生DElisa
輪蟲(chóng)弧 5-氨基煙酸抗人心肌肌鈣蛋白抗體Elisa
動(dòng)物乳桿 10%胰蛋白胨大豆肉湯抗人肌紅蛋白抗體Elisa
淡紫擬青霉 10%胰酪胨大豆肉湯纖溶原Elisa
伯頓擬內(nèi)孢霉 月桂基硫酸鹽蛋白胨肉湯LST管(雙料,,含小導(dǎo)管)弓形蟲(chóng)Elisa
褐環(huán)粘蓋牛肝 0.85%無(wú)鹽水(10ml/支)抗脊髓灰質(zhì)炎Virues1-3 IgG抗體Elisa
研究團(tuán)隊(duì)谷氨酸桿 2-氨基-3,5-二溴吡抗傷寒Vi多糖IgG抗體Elisa
噬纖維 0.85%無(wú)鹽水(9ml/支)抗傷寒Vi多糖IgM抗體Elisa
蘇云金芽孢桿 3%堿性蛋白胨水白脂Elisa
大腸埃希氏 緩沖蛋白胨水(BPW)音猬因子Elisa