產(chǎn)品屬性:
中文名稱:ROCK抑制劑(azaindole1)
英文名稱:ROCK inhibitor
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
ROCK抑制劑(azaindole1)是人ROCK-1和ROCK-2抑制劑,IC50分別為0.6和1.1nM,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:867017-68-3 別名:Rho Kinase Inhibitor;ROCK 純度:99.17% 分子量:402.79 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
馬泰勒蟲(青海湟源株)癲癇樣相關(guān)蛋白6抗體Anti-OPCML Antibody磷脂酰肌特異性磷酯Cγ2(PLCγ2)
絨毛栓菌組蛋白連接作用蛋白抗體Anti-OPTN Antibody磷脂酰肌特異性磷酯Cβ3(PLCβ3)
短短芽孢桿菌線粒體乙?;?/span>3抗體Anti-OPTN Antibody(PB0335)磷脂酰肌特異性磷酯Cβ1(PLCβ1)
枯草芽孢桿菌鈉轉(zhuǎn)運體蛋白8抗體Anti-ORAI1 Antibody磷脂酰肌結(jié)合網(wǎng)格蛋白裝配蛋白(PICALM)
小葉相思根瘤菌腫瘤抑制基因PEPE1抗體Anti-ORAI1 Antibody磷脂酰肌蛋白聚糖6(GPC6)
克魯斯假絲酵母Sestrin3抗體Anti-ORM1 Antibody(PB1006)磷脂酰肌蛋白聚糖5(GPC5)
別氏不動桿菌組蛋白甲基轉(zhuǎn)移SMYD4抗體Anti-Orai2 Antibody磷脂酰肌蛋白聚糖4(GPC4)
香菇同源轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白Sin3A抗體Anti-OSBP Antibody磷脂酰肌蛋白聚糖3(GPC3)
香菇信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子5b抗體Anti-OSM Antibody磷脂酰肌蛋白聚糖2(GPC2)
異配囊接霉磷化信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子5b抗體Anti-OSM Antibody磷脂酰肌蛋白聚糖1(GPC1)
黑曲霉血管內(nèi)皮生長因子受體相關(guān)蛋白抗體Anti-OSM Antibody磷脂酰甘油磷合1(PGS1)
大米 轉(zhuǎn)基因成分(陽性)鈉氫通道蛋白9家族A9抗體Anti-OSM Antibody磷脂(PA)
毛木耳雜6類泛蛋白3抗體Anti-OTC Antibody磷脂爬行5(PLSCR5)
蘇云金桿菌武漢亞種神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體Anti-OTOF Antibody(PB0650)磷脂爬行4(PLSCR4)
地衣芽孢桿菌跨膜蛋白Smoothened抗體Anti-OTULIN Antibody磷脂爬行3(PLSCR3)
糞產(chǎn)堿桿菌斯鈣抗體Anti-OXCT1/SCOT Antibody磷脂爬行2(PLSCR2)
生殖細胞增殖相關(guān)蛋白NANOS1抗體齲羅斯氏菌人前列腺上皮細胞提取物
同源盒蛋白NOBOX抗體人皮桿菌人膀胱平滑肌細胞提取物
轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NKX6.1抗體拉氏西地西菌人腎系膜細胞提取物
造血蛋白1抗體戴氏西地西菌人腎動脈內(nèi)皮細胞提取物
ROCK抑制劑(azaindole1)黃曲霉 異蓮心堿脂氧合Elisa
秦氏蜜環(huán) 山柰酚-3-O-蕓香糖苷酸性脂肪Elisa
秦氏蜜環(huán) 異葒草苷中性脂肪Elisa
釀酒酵母 短葶山麥冬皂苷C腸三葉因子Elisa
大腸埃希氏桿 蝦青脂肪酸結(jié)合蛋白2Elisa
燼灰孢鏈霉 坡模酸脂肪甘油三酯脂Elisa
單胞屬 荊芥油糖原磷酸化Elisa
嗜熱脂肪芽胞桿 圣草查爾酮糖原合成Elisa
長柄大環(huán)柄菇 芫花精氨酸脫羧Elisa
絲狀支原體絲狀亞種 圣草酚鳥氨酸脫羧Elisa
根瘤 大黃-8-β-D-吡喃葡萄糖苷磷脂AElisa
潮濕學校擬諾卡氏 土大黃苷精氨酸代琥珀酸裂解Elisa
釀酒酵母 鉤藤堿精氨酸代琥珀酸合成Elisa
桔青霉 苦參酮鳥氨酸氨酰轉(zhuǎn)移Elisa
裂擬迷孔 三尖杉酯堿鳥氨酸轉(zhuǎn)氨Elisa
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)