Hsp70抑制劑(Apoptozole)公司正在出售的產(chǎn)品：Langerin/CD207/FITC 熒光標(biāo)記白分化抗原CD207抗體IgG3-羥-1,2,3-苯并三-4(3H)-酮 98%
LAMA3/Laminin 5 alpha 3/FITC 熒光標(biāo)記層粘蛋白α3抗體IgG2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲六氟酯 99%
LAP18/stathmin/FITC 熒光標(biāo)記

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

炭黑曲霉大鼠中性粒趨化蛋白2Anti-TAF1 Antibody人白調(diào)節(jié)(LR)

松生莖點(diǎn)霉人類嗜T淋巴Ⅰ型病Anti-TACR3 Antibody人血小板生成(TPO)

長(zhǎng)雙歧桿菌大鼠FMS樣酪激3Anti-TACR2 Antibody人血小板生成(TPO)

鴨疫里氏桿菌人麻疹病Anti-TAF1 Antibody人白血病抑制因子(LIF)

畢赤酵母大鼠FMS樣酪激3配體Anti-TAF13 Antibody人白血病抑制因子(LIF)

耐冷冷桿菌大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子9Anti-TAF1A Antibody人Salusin-α

香菇人流行性腮腺炎Anti-TAF15 Antibody人Salusin-α

膜醭假絲酵母大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子4Anti-TAF3 Antibody人胰島受體底物2(IRS-2)

咸海鮮芽孢桿菌人抗流行性出血熱病抗體IgGAnti-TAF4 Antibody人胰島受體底物2(IRS-2)

傳染性支氣管炎病人痢疾內(nèi)阿米巴抗原Anti-TAF5 Antibody人轉(zhuǎn)甲狀腺蛋白(TTR)

弗雷德里克斯堡假單胞菌大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子6Anti-TAF5L Antibody人轉(zhuǎn)甲狀腺蛋白(TTR)

紫紅曲霉大鼠性成纖維生長(zhǎng)因子1Anti-TAF6L Antibody人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)

環(huán)形泰勒蟲(chóng)（安西株）人萊姆IgGAnti-TAGAP Antibody人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)

中間根瘤菌屬人空腸彎曲菌黏附蛋白Anti-TAIP-2 Antibody人胰島淀粉樣多肽(IAPP)

根瘤菌人衣原體蛋白樣活性因子Anti-TANK Antibody人胰島淀粉樣多肽(IAPP)

玫煙色棒束孢大鼠凋亡相關(guān)因子Anti-TAL1 Antibody人糖化蛋白(GSP)

尿鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1抗體血紅鉚釘菇HASMC*培養(yǎng)基

未分化胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子1抗體一色齒毛菌DMEM 培養(yǎng)基 （高糖）

囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Use1抗體葡萄座腔菌（斜面）大鼠軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基

軟骨基質(zhì)相關(guān)蛋白UCMA抗體白色小環(huán)柄菇TM3細(xì)胞專用培養(yǎng)基
Hsp70抑制劑(Apoptozole)多根硬皮馬勃 異香蘭

艱難梭 異龍腦

金灰青霉 鹽酸拓?fù)涮婵?/span>

柑橘炭疽盤孢 異去甲蟛蜞菊內(nèi)酯

金黃色葡萄球金黃亞種 亞麻酸乙酯

大腸埃希 新西蘭牡荊苷

枯草芽孢桿 纈草

類阿達(dá)青霉 關(guān)附甲

綠臭蛙叢毛單胞 旋復(fù)花內(nèi)酯

黑曲霉 8-香葉草氧基補(bǔ)骨脂

林生毛霉 熊果酸乙酸酯

野土地桿 細(xì)辛

釀酒酵母 香葉

根瘤 小檗紅堿硫酸酯

耐冷冷桿 腺