產品屬性:
中文名稱:Akt廣譜抑制劑(Afuresertib)
英文名稱:Afuresertib
產品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
Afuresertib是一種有效的ATP競爭性的Akt廣譜抑制劑,作用于AKT1,,AKT2和AKT3,,Ki分別為0.08,,2和2.6nM。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1047644-62-1 別名:GSK2110183 純度:98.91% 分子量:427.32 儲存條件:-20℃避光保存于氮氣中。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控,;
⑤細胞分化及其調控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
孤島鹽單胞菌二甲基化組蛋白H3K4抗體Human SCN4B ELISA Kit類人猿
海南小短桿菌二甲基化組蛋白H3K9抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit類人猿免疫球蛋白G4(IgG4)免疫試劑盒
梾木生殼針孢基化組蛋白H3抗體Human SEC23IP ELISA Kit類人猿巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒
植物乳桿菌植物亞種乙?;M蛋白H3抗體Human VTCN1(V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1) ELISA Kit類人猿降鈣基因相關肽(CGRP)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌乙?;M蛋白H3抗體Human SEC24C ELISA Kit類人猿降鈣(CT)免疫試劑盒
燼灰紅鏈霉菌果糖發(fā)酵亞種磷化肝核因子4α抗體Human SEC24A ELISA Kit類人猿黃體生成(LH)免疫試劑盒
賴芽胞桿菌屬高遷移率核小體結合蛋白1Human SEC31A ELISA Kit類人猿骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒
根瘤菌磷化組蛋白H3抗體Human SDR39U1 ELISA Kit蝌蚪
木蹄層孔菌組織相容性復合體α抗體Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit蝌蚪睪(T)免疫試劑盒
黑木耳肝生長因子激活抑制蛋白2抗體Human SEC61alpha ELISA Kit蝌蚪雌二(E2)免疫試劑盒
植物乳桿菌HOMER2抗體Human SDR42E1 ELISA Kit蝌蚪γ基丁(GABA)免疫試劑盒
蟲類神食酵母瘤病調控因子1抗體(鋅指蛋白395)Human SDCCAG8 ELISA Kit鯨
桔橙小單孢菌人類狀瘤病18 E6單克抗體Human SCN4B ELISA Kit鯨孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
白鵝膏菌(不可訂購)異質核糖核蛋白F抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit鯨狀腺原(T3)免疫試劑盒
沃氏富鹽菌異質核糖核蛋白K抗體Human SCNM1 ELISA Kit鯨皮質(Cortisol)免疫試劑盒
相思根瘤菌異質核糖核蛋白L抗體Human SCNN1A ELISA Kit鯨甲狀腺(T4)免疫試劑盒
: N144資源名稱: 大腸埃希氏菌 質量規(guī)格:1.0 M in toluene常春藤皂苷元
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規(guī)格:分析標準品D-松
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規(guī)格:分析標準品可可堿
Akt廣譜抑制劑(Afuresertib)根霉 化鐠補體蛋白4Elisa
嗜熱鏈球 氫氧化鉍過氧化Elisa
土地芽孢桿 5-氟脫氧胞苷乙型腦炎病抗體Elisa
解脂假絲酵母解脂變種 酸桂酯骨成型蛋白2Elisa
假單胞屬 4-硝基對三聯(lián)苯骨成型蛋白7Elisa
枯草芽孢桿 桂酸苯乙酯骨膜蛋白Elisa
植物乳桿 4-(嘧啶硫代)乙酸布魯氏桿Elisa
運動節(jié)桿 二芐膽囊收縮Elisa
哈茨木霉 Fmoc-N-甲基-D-亮氨酸游離羥脯氨酸Elisa
釀酒酵母 Fmoc-N-甲基-L-亮氨酸基質金屬蛋白1Elisa
克勞氏芽孢桿 Fmoc-N-甲基-D-纈氨酸基質金屬蛋白2Elisa
韓國假單胞 Maprotiline HCl基質金屬蛋白3Elisa
Enterobacter cloacae subsp. dissolvens 2-羥基-D-谷氨酸 二鈉鹽基質金屬蛋白8Elisa
大腸埃希 鳥嘌呤硫酸鹽基質金屬蛋白9Elisa
球毛殼霉 L-亮氨酰-L-亮氨酰-L-亮氨酸基質金屬蛋白1Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)