Aurora B和C抑制劑（GSK1070916）公司*的產(chǎn)品：INS(Mouse Insulin)ELISA Kit 小鼠胰島氟化鎂 AR，97.5%
HIF-1 Alpha(Mouse hypoxia-inducible factor 1 Alpha)ELISA Kit 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α氟化鎂 CP，95.0%
NN-T4(Mouse Neonatal Thyroxine)EL

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：Aurora B和C抑制劑（GSK1070916）

英文名稱(chēng)：GSK-1070916

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二,、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；

6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

裂褶菌PE標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPMT Antibody二氫葉還原(DHFR)

鞘孢囊菌PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPP1 Antibody二氫乳清脫氫(DHODH)

克勞氏芽孢桿菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPR Antibody二氫嘧啶脫氫(DPYD)

弗氏鏈霉菌APC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPX2 Antibody二氫嘧啶樣蛋白3(DPYSL3)

桔青霉Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPSAB1 Antibody二氫嘧啶(DPYS)

Methylobacterium plataniAlexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRADD Antibody二氫硫辛轉(zhuǎn)乙?；?DLAT)

大腸埃希氏桿菌堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPSAB1 Antibody二氫硫辛脫氫(DLD)

PseudosalinisphaeraFITC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRAC Antibody二氫硫辛琥珀酰轉(zhuǎn)移(DLST)

竹喙球菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRAF1 Antibody二氫二脫氫2(DDH2)

腐皮鐮孢Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRAF2 Antibody二氫二脫氫(DHDH)

小單孢菌PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRAF1 Antibody二羥基激2(DAK)

茄類(lèi)鐮刀菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRAF2 Antibody二磷甘油變位(BPGM)

塊鱗灰青鵝膏菌羅丹明標(biāo)記的兔抗豚鼠IgGAnti-TRAF2 Antibody二甲基精二水解2(DDAH2)

禾谷絲核菌Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgMAnti-TRAF4 Antibody二甲基精二水解1(DDAH1)

黑曲霉Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgMAnti-TRAF5 Antibody二甲基甘脫氫(DMGDH)

白僵菌PE標(biāo)記的兔抗豚鼠IgMAnti-TRAF3 Antibody二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC)

piwi樣2蛋白抗體海洋鹽單胞菌人體子宮癌組織提取物

豬瘟抗體Georgeniamuralis人體皮膚癌組織提取物

RNA聚合1和轉(zhuǎn)錄釋放因子抗體善變副球菌人體宮頸癌組織提取物

染色質(zhì)組裝因子1P55抗體耐鹽芽孢桿菌人體膠質(zhì)瘤組織提取物
Aurora B和C抑制劑（GSK1070916）普通變形桿 次皂甙元CP4

Sphingopyxis litoris 丹參酸B 鎂鹽

香菇5 Levatin

釀酒酵母 beta-澳洲茄邊堿

巴克紅曲霉 鳳仙萜四苷F

無(wú)花果沙雷氏 Croverin

淡紫擬青霉 Crovatin

木德氏霉 丹參B

果生鏈核盤(pán) 伏波酯-12-惕各酸酯-13-異丁酸酯

Escherichia 伏波酯-12-惕各酸酯-13-異丁酸酯

蘇云金芽胞桿阿萊亞種 酚葡萄糖酸苷

變灰青霉 異丹參酮IIA

葡萄座腔 異丹參酮I

聚貪噬 異隱丹參酮

安洛小皮傘(鬼毛針) 異綠原酸C(4,5) 

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2,、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3,、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí),，使MTT 還原為甲臜。

6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻,。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8,、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值,，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)