產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PI3K抑制劑(HS-173)
英文名稱:HS-173
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
HS-173是一種新穎的PI3K抑制劑,常用于癌癥研究,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1276110-06-5 純度:99.32% 分子量:422.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
果生鏈核盤菌大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體ⅡAnti-STEA2 Antibody人淋巴功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)
根瘤菌大鼠腫瘤壞死因子βAnti-STEAP3 Antibody人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)
炭疽芽孢桿菌人沙眼衣原體Anti-STIM2 Antibody人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)
葡萄座腔菌人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白BAnti-STIM2 Antibody人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)
擬盤多毛孢Y9大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3Anti-STK10 Antibody人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白AAnti-STK17B Antibody人載脂蛋白A1(apo-A1)
白丘鏈霉菌大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1Anti-STK17B Antibody人載脂蛋白A1(apo-A1)
球孢白僵菌人前病整合位點(diǎn)1Anti-STK24 Antibody人載脂蛋白B100(apo-B100)
根瘤菌大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4Anti-STK32C Antibody人載脂蛋白B100(apo-B100)
Tarimoccocus大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體Anti-STK33 Antibody人白血病抑制因子受體(LIFR)
密枝瑚菌人綠膿桿菌外AAnti-STK24 Antibody人白血病抑制因子受體(LIFR)
根瘤菌人流感病AAnti-STK36 Antibody人免疫球蛋白A(IgA)
魯氏不動(dòng)桿菌大鼠尿激型纖溶原激活物Anti-STMN3 Antibody人免疫球蛋白A(IgA)
雷斯廷加假絲酵母大鼠尿激型纖溶原激活物受體Anti-STMN3 Antibody人免疫球蛋白G(IgG)
釀酒酵母人乙型肝炎表面抗原Anti-STK38L Antibody人免疫球蛋白G(IgG)
硫磺菌人抗乙型肝炎病核心抗體Anti-STMN4 Antibody人免疫球蛋白M(IgM)
髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1抗體鏈格孢菌人腎臟腫瘤細(xì)胞
髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體根瘤菌雜交瘤(B類)
端粒相關(guān)蛋白2/端粒逆轉(zhuǎn)錄抗體白囊耙齒菌(斜面)抗人肝癌單抗HAb187
血小板反應(yīng)蛋白2/凝血敏感蛋白2抗體串珠鐮孢菌抗人環(huán)孢菌A-17
PI3K抑制劑(HS-173)季也蒙邁耶氏酵母 茵芋苷
蘇云金芽孢桿庫(kù)爾斯塔克亞種 亞油酸甲酯
谷棒桿Ⅲ型 油酸甲酯
馬賽 硬脂酸甲酯
斯托克正青霉 乙酰蒲公英萜
擬青霉 異古倫賓
冷桿
大腸埃希氏桿 原七葉皂苷元
黑曲霉 乙氧基血根堿
香菇(可訂購(gòu)) 遠(yuǎn)華蟾蜍精
大腸桿屬 氧化槐定堿
球孢白僵 薏苡
嗜堿鹽單胞 8-氧黃連堿
大腸埃希氏 異橙黃酮
爪哇漏斗狀側(cè)耳(鳳尾菇) 月桂氮卓酮
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)