詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱(chēng):III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)
英文名稱(chēng):Type III collagenase (enzyme buffer containing 100mL)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào):GOY-X0543?
公司向您推薦細(xì)胞的詳細(xì)說(shuō)明:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 規(guī)格 |
III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) | Type III collagenase (enzyme buffer containing 100mL) | 5×105cells/瓶 |
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),,可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞,,需要時(shí),,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素,。
(2)表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān),。
III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)生理變化:
(1)主動(dòng)脈硬化,。
(2)主動(dòng)脈瘤
(3)主動(dòng)脈鈣化。
144506-19-496T和肽素(CPP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
22212-26-696TBiopyrrin蛋白(BPn)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
83218-34-296T線(xiàn)粒體肌激酶1B(CKMT1B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
58139-23-496T普列克底物蛋白同源物樣域家族A成員2(PHLDA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
18887-19-996T基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
80952-72-396T肌原纖蛋白2(FBN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
7554-90-796T粘蛋白17(MUC17)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
560-66-796T性別決定區(qū)Y框蛋白1(SOX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
3-Bromo-1-butyne
(1S,2S,3R,5S)-(+)-2,3-蒎烷醇
(1S,2S,3R,5S)-(+)-2,3-蒎烷醇
(1S,2S,3R,5S)-(+)-2,3-蒎烷醇
(1S,2S,3R,5S)-(+)-2,3-蒎烷醇
2-巰基-1,3,,4-噻唑(MTD)
2-巰基-1,,3,4-噻唑(MTD)
鄰苯乙
鄰苯乙
鄰苯乙
基本特性:
(1)組織來(lái)源于正常大鼠大動(dòng)脈組織,。
(2)鑒定:肌動(dòng)蛋白,,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存,。
(4)每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml,。
(5)肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證,。
(6)不含有HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類(lèi),;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí),。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80 度冰箱,,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取