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胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)說明書

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更新時間:2019-08-01 13:08:31瀏覽次數(shù):587

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/瓶
貨號 GOY-X0537 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅用于科研    
胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)說明書冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱:胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)說明書
英文名稱:#NAME?
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:GOY-X0537
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產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)說明書

#NAME?

5×105cells/瓶

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,,包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu)、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,,同時,,可以施加化學(xué)、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,,需要時,,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素,。
(2)表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān),。
胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)說明書生理變化:
(1)主動脈硬化,。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化。
110241-19-596T著絲粒蛋白I(CENPI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

86377-52-896T免疫球蛋白G4(IgG4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

294674-09-296T補(bǔ)體1抑制因子(C1INH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

149507-55-196T前列腺素F受體(FP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

508182-41-096T前列腺素E受體2(EP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

112430-64-596T載脂蛋白C1(APOC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

98665-21-596T麥芽糖酶糖化酶(MGA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

120462-47-796TⅡ型前膠原羧基端原肽(PⅡCP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
芳樟醇

4-硝基苯硫酚

4-硝基苯硫酚

硝鉑溶液

2-氟-3-(三氟甲基)苯甲基溴

4-氟-3-三氟甲基溴芐

4-氟-3-三氟甲基溴芐

3-氟-5-(三氟甲基)苯甲醇

3-氟-5-(三氟甲基)苯甲醇

2--4-煙甲酯
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色,。
(3)原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每凍存管細(xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml,。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證,。
(6)不含有HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。      
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。  
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,,DMSO 終濃度為 10%,,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,,注意凍 存管做好標(biāo)識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取

 

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