商品介紹:
OTS514是一種高效的TOPK抑制劑,IC50為2.6nM,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1338540-63-8 純度:99.44% 分子量:364.46 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:TOPK抑制劑(OTS514)
英文名稱:OTS514
產品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調控,;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
玉米大斑病菌層粘連蛋白受體1抗體Anti-CYP2C18 Antibody人白介6(IL-6)
三色革裥菌層粘連蛋白受體1抗原(C端)Anti-CYP2C19 Antibody人白介6(IL-6)
冷桿菌屬中期因子/肝結合生長因子抗原Anti-CYP2D6 Antibody人白介-5(IL-5)
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種肌球蛋白輕鏈3抗原Anti-CYP2J2 Antibody人白介-5(IL-5)
相思根瘤菌巨噬移動抑制因子抗原Anti-CYP2S1 Antibody人白介4(IL-4)
沙雷氏菌巨噬炎癥因子1β 抗原Anti-CYP2R1 Antibody人白介4(IL-4)
波多野氏微桿菌CD122/白介2受體β鏈抗原Anti-CYP2W1 Antibody人白介3(IL-3)
腓特烈斯堡分枝桿菌巨噬炎癥蛋白2抗原Anti-CYP2U1 Antibody人白介3(IL-3)
釀酒酵母基質金屬蛋白13抗原Anti-CYP39A1 Antibody人白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )
赭曲霉基質金屬蛋白20抗原Anti-CYP4A11 Antibody人白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )
Burkholderia sp. 基質金屬蛋白-17抗原Anti-CYP3A4 Antibody人白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)
雜色曲霉基質金屬蛋白-26抗原Anti-CYP4B1 Antibody人白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)
Asticcacaulis?基質金屬蛋白-9抗原Anti-CYP3A7 Antibody人白介2(IL-2)
中國農大湖積物桿菌基質金屬蛋白-10抗原Anti-CYP4F11 Antibody人白介2(IL-2)
克魯斯假絲酵母髓過氧化物抗原Anti-CYP4F2 Antibody人白介1α(IL-1α )
多藥耐藥相關蛋白2Anti-CYP4Z1 Antibody人白介1α(IL-1α )
磷二酯4A8抗體黃曲霉人卵巢顆粒細胞
原鈣粘蛋白β7抗體土曲霉人正常子宮頸上皮細胞
原鈣粘蛋白γA3抗體桔青霉大鼠主動脈平滑肌細胞
蛋白Z抗體大毛霉人源口腔鱗狀細胞癌細胞系
TOPK抑制劑(OTS514)傳染性喉氣管炎病 Dihydrosesamin
微球 (-)-白玉蘭亭B
松杉靈芝 Demethoxycapillarisin
糞腸球 去氫克班寧
維氏鞘氨單胞 Deacetylxylopic acid
蘋果黑腐皮殼 Dammar-20(21)-ene-3β,24,25-triol
粗糙鏈孢霉* Cycloolivil
棒狀乳桿棒狀亞種 桐
硬結節(jié)桿 3-鼠李糖苷兒茶
甜菜蛇眼病莖點霉 螺
布氏假單胞 Broussonin B
耐久腸球 望春玉蘭脂 C
棲河屬 Auriculasin
多主葡萄殼 Andropanoside
楷米干酪 Andropanolide