Bcl-xL/Bcl-2/Bcl-w抑制劑公司*的產(chǎn)品：CA125 (Ovarian cancer gen) 卵巢癌抗原（抗原）3-硫酚 97%
CK19 角蛋白19抗原4-巰苯 99%
CAD(Caspase-Activated Deoxyribonuclease) Caspase 激活的脫氧核糖核（抗原）4-(硫) 98%
Calponin 1 鈣調(diào)節(jié)蛋白-1（抗原）2-硫酚 9

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Bcl-xL/Bcl-2/Bcl-w抑制劑

英文名稱：ABT-737

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二,、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；

6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

擬枝孢鐮孢DNA聚合γ/DNA pol γ抗體Human TEFM (Transcription elongation factor, mitochondrial) ELISA KIT人板層相關(guān)多肽2亞型α(TMPO)免疫試劑盒

污黑腐皮殼DNA聚合ι/DNA pol ι抗體Human TP53RK (TP53-regulating kinase) ELISA KIT人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)免疫試劑盒

黃硬皮馬勃DNA聚合κ/DNA pol κ抗體Human TANK (TRAF family member-associated NF-kappa-B activator) ELISA KIT人百日咳病抗體(IgM)免疫試劑盒

粘帚霉屬DNA聚合λ/DNA pol λ抗體Human TSKS (Testis-specific serine kinase substrate) ELISA KIT人百日咳病抗體(IgA)免疫試劑盒

雙孢蘑菇DNA聚合μ/DNA pol μ抗體Human TOPORS (E3 ubiquitin-protein ligase Topors) ELISA KIT人白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒

費(fèi)氏中華根瘤菌周期蛋白3抗體Human ADA(Adenosine deaminase) ELISA Kit人白酯(LE)免疫試劑盒

匿名曲霉DNAJC9蛋白抗體Human ELOVL1(Elongation of very long chain fatty acids protein 1) ELISA Kit人白免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)免疫試劑盒

干草寒冷桿菌DNA甲基轉(zhuǎn)移2抗體Human TBCK (TBC domain-containing protein kinase-like protein) ELISA KIT人白抗原DR(HLA-DR)免疫試劑盒

豬丹絲菌DNA甲基轉(zhuǎn)移3L抗體Human TBKBP1 (TANK-binding kinase 1-binding protein 1) ELISA KIT人白活化黏附因子(ALCAM)免疫試劑盒

卵孢木霉二肽基肽10抗體Human PERP (p53 apoptosis effector related to PMP-22) ELISA KIT人白調(diào)節(jié)(LR)免疫試劑盒

蠟狀芽孢桿菌二肽基肽3抗體Human TSKS (Testis-specific serine kinase substrate) ELISA KIT人白色念珠菌(C.albicans)免疫試劑盒

聚生殼菌DNA復(fù)制相關(guān)元件結(jié)合因子抗體Human TP53RK (TP53-regulating kinase) ELISA KIT人白三烯E4(LTE4)免疫試劑盒

伊平屋橋大洋芽孢桿菌B淋巴轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白DRIL1抗體Human TRAPPC12 (Trafficking protein particle complex subunit 12) ELISA KIT人白三烯D4(LTD4)免疫試劑盒

頂青霉轉(zhuǎn)錄共激活因子130抗體Human TANK (TRAF family member-associated NF-kappa-B activator) ELISA KIT人白三烯C4(LTC4)免疫試劑盒

耐久腸球菌核糖核3/Drosha抗體Human TOX (Thymocyte selection-associated high mobility group box protein TOX) ELISA KIT人白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒

豇豆慢生根瘤菌脫氧胸苷激DTYMK抗體Human TRHR (Thyrotropin-releasing hormone receptor) ELISA KIT人白介增強(qiáng)子結(jié)合因子2(ILF2/NF45/PRO3063)免疫試劑盒

毛木耳Auricularia│polytricha 質(zhì)量規(guī)格：三價(jià)鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/ml羅漢果苷VI

ATCC15491資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：羅漢果苷IV

馬克斯克魯維酵母Kluyveromyces│marxianus 質(zhì)量規(guī)格：100µg/mL,基體：羅漢果苷III
Bcl-xL/Bcl-2/Bcl-w抑制劑乳桿屬 三(3,5-二叔丁基-4-羥芐基)異脲酸酯α平滑肌肌動(dòng)蛋白抗體Elisa

絨毛青霉 二甲基十八烷基[3-氧基硅基]化銨番茄紅Elisa

柄桿 5-噻吩-2-磺酰尿Elisa

尖孢鐮刀 BOC-L-絲氨酸甲酯三磷酸腺苷受體Elisa

生癌腸桿 矢車菊半乳糖苷肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移IIElisa

大腸桿 2,4-二-6,7-二甲氧基喹唑啉CD133分子Elisa

白僵 (±)-哌-2-羧酸B瘤-XElisa

土曲霉金色變種 1-芐基哌B瘤-WElisa

地衣芽孢桿 替洛隆雄酮Elisa

嗜鹽動(dòng)性球 2-溴乙基基溴化銨可溶性補(bǔ)體受體Elisa

三葉草根瘤 4-羥基-8-甲氧基喹啉-3-羧酸乙酯雄甾酮Elisa

木賊鐮孢 1,3-二甲基-5-吡唑酮雌三Elisa

麥根腐平臍蠕孢 2-甲氧基-4-氨基甲酯卵清蛋白Elisa

平菇(南京1號(hào)) L-氨基琥珀酸脫氫Elisa

青霉  1-(4,4'-二氟苯甲基)哌轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體1Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物,。

3、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí),，使MTT 還原為甲臜,。

6、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8,、結(jié)果分析

a,、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細(xì)胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值,，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)