詳細介紹
產(chǎn)品名稱:C918(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞)說明書
英文名稱:C918 (human choroidal melanoma cells)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:GOY-X0821?
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C918(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞)說明書 | C918 (human choroidal melanoma cells) | 5×105cells/瓶 |
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,,并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,,可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,,需要時,,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué)、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設(shè)備,。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,,參與血管壁的炎癥反應(yīng),。
(3)與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關(guān)。
C918(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞)說明書生理變化:
(1)主動脈硬化,。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化,。
85483-97-2化學(xué)試劑孕烷X受體(PXR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
855-38-9化學(xué)試劑骨骼肌特異性受體酪氨激酶(MUSK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
855-38-9化學(xué)試劑糖化血紅蛋白(HbA1C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
85-68-7化學(xué)試劑抑肽酶(AP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
85-68-7化學(xué)試劑皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白(CBG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
857876-30-3化學(xué)試劑FK506結(jié)合蛋白5(FKBP5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
859155-81-0化學(xué)試劑單酰甘油-O-酰基轉(zhuǎn)移酶2(MOGAT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
859155-81-0化學(xué)試劑酰甘油-O-?;D(zhuǎn)移酶同源物2(DGAT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
9001-32-5化學(xué)試劑羧酯酶4A(CES4A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
9001-32-5化學(xué)試劑磷脂酶D5(PLD5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
9001-32-5化學(xué)試劑羥基丙異構(gòu)酶(HYI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
9010-66-6化學(xué)試劑甘油磷膽堿磷酯酶(GPCPD1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
9010-66-6化學(xué)試劑羧肽酶X2(CPX2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
9010-66-6化學(xué)試劑紡錘體蛋白4(SPIN4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
9007-73-2化學(xué)試劑紡錘體蛋白3(SPIN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
9007-73-2化學(xué)試劑Fritz蛋白(FRTZ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織,。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色,。
(3)原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存,。
(4)每凍存管細胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)肌動蛋白,,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證,。
(6)不含有HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌,。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,;
1. 細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,,細胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,,輕輕混勻,,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80 度冰箱,,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取