商品介紹:
JWH133是一個強(qiáng)的和選擇性的CB2激活劑,Ki值是3.4nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:259869-55-1 純度:95.0% 分子量:312.49 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CB2激活劑(JWH-133)
英文名稱:JWH-133
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
豬丹絲菌小鼠白介1βAnti-SMARCC2 Antibody人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)
短波單胞菌人抗紡錘體抗體Anti-SMC1A Antibody人血清白蛋白(HSA)
鞘單胞菌屬大鼠巨噬炎性蛋白2Anti-SMARCAL1 Antibody人血清白蛋白(HSA)
漏斗多孔菌小鼠肌紅蛋白Anti-SMG7 Antibody人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)
熱噬淀粉芽孢桿菌人抗角蛋白抗體Anti-SMYD2 Antibody人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)
好熱地芽孢桿菌小鼠血栓B2Anti-SNAPC5 Antibody人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)
提純牛型結(jié)核菌大鼠巨噬炎性蛋白3βAnti-SNCA Antibody人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)
炭黑曲霉大鼠基質(zhì)金屬蛋白1Anti-SNCA Antibody人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)
醬油曲霉人抗中性粒核周抗體Anti-SNX3 Antibody人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)
土味鏈霉菌小鼠乙酰Anti-SNCB Antibody人纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)
黃褐杯傘大鼠尾加壓2Anti-SND1 Antibody人纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)
紫絳紅鏈霉菌人抗中性粒胞漿抗體Anti-SOD2 Antibody人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)
枯草芽孢桿菌小鼠白三烯B4Anti-SOS2 Antibody人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)
枯草芽孢桿菌人抗凝血抗體Anti-SNX3 Antibody人血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)
肉糜 貓?jiān)葱猿煞郑ǘㄐ裕┐笫蠡|(zhì)金屬蛋白13Anti-SOD3 Antibody人血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)
樟疫霉小鼠白血病抑制因子受體Anti-SOX12 Antibody人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)
環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體糞生黑蛋巢菌(斜面)HSP70
四環(huán)抗體黃孢原毛平革菌GC-5D1
T細(xì)胞受體γ抗體撕裂蠟孔菌11B6
轉(zhuǎn)錄因子3抗體螺旋環(huán)螺旋蛋白HE47芽孢桿菌1D12-B5
CB2激活劑(JWH-133)金龜子綠僵 紅杉
釀酒酵母 辣椒堿(合成)
微小鏈霉 蒿乙
*百脈根根瘤 漢防己
污斑新擬盤多毛孢 甘草酸單鹽
彩色豆馬勃 對二甲氨基苯甲
茶薪菇 丹皮磺酸鈉
球孢白僵 長春
大腸埃希氏 長春
谷棒桿Ⅰ型 白樺雙乙酰酯
產(chǎn)腸大腸埃希氏 巴亭III
β-隱黃質(zhì)
釀酒酵母 D-半乳糖酸
小麥生鏈格孢 7-木糖基-紫杉
大囊毛霉 7-木糖苷-10-脫乙?;仙?nbsp;