vanin抑制劑(RR6)公司正在出售的產(chǎn)品：JAK2/FITC 熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)酪氨激JAK-2抗體IgG2-巰煙 99%
phospho-JAK2(Tyr221) /FITC 熒光標(biāo)記化蛋白酪氨激JAK-2抗體IgG浴銅靈 98%
phospho JAK2(Tyr1007+Tyr1008)/FITC 熒光標(biāo)記化蛋白酪氨激JAK-2抗體IgG浴銅靈 purified by sublima

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）,。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán)。
釀酒酵母小鼠Ⅰ型膠原Anti-SLC9A6 Antibody人性T淋巴相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)

硬結(jié)節(jié)桿菌人抗Anti-SLC9A7 Antibody人免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)

香菇人抗核糖體P蛋白抗體Anti-SLC9A3R2 Antibody人免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)

枯草芽孢桿菌小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽Anti-SLC9A8 Antibody人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)

薄花邊皮傘大鼠單核趨化蛋白1Anti-SLCO1B1 Antibody人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)

癭青霉小鼠可溶性P選擇Anti-SLCO1A2 Antibody人皮膚淋巴相關(guān)抗原(CLA)

蘋(píng)果鏈格孢人抗骨骼肌抗體Anti-SLIT3 Antibody人皮膚淋巴相關(guān)抗原(CLA)

硫氧化檸檬胞菌大鼠單核趨化蛋白2Anti-SLIT2 Antibody人凝血血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)

紅色鹽幾何形菌大鼠單核趨化蛋白3Anti-SLC9A9 Antibody人凝血血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)

布氏乳桿菌人甲狀腺抗體Anti-SMAD1 Antibody人溶血補(bǔ)體(Hc)

枇杷假尾孢小鼠S100蛋白Anti-SLU7 Antibody人溶血補(bǔ)體(Hc)

平菇小鼠白介1Anti-SLK Antibody人T受體(TCR)

枯草芽孢桿菌人胰島抗體Anti-SMAD1 Antibody人T受體(TCR)

模擬乳粉霉菌酵母菌質(zhì)控樣品(定量)大鼠巨噬集落激因子Anti-SMAD2 Antibody人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)

黃色粘球菌*大鼠巨噬來(lái)源的趨化因子Anti-SMARCA2 Antibody人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)

枯草芽孢桿菌人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體Anti-SMARCC2 Antibody人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)

環(huán)指蛋白98抗體血耳抗人谷光甘肽轉(zhuǎn)移單抗FMU-GST17

形成相關(guān)凋亡蛋白7抗體枝孢霉皰疹病毒單抗7

轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2抗體TGF-βRⅡ,，TGFβRⅡ白黃小薄孔菌（斜面）ACV1

腫瘤壞死因子受體超家族成員14抗體教酒鏈霉菌H1H8
vanin抑制劑(RR6)彎孢霉 蕎麥堿

枯草芽孢桿 七葉皂苷

埃德?tīng)栨溍?/span> 米那普侖鹽酸鹽

腐皮鐮孢 萊菔

嗜熱假諾氏 苦味

平菇—佛羅里達(dá) 糠酸

嗜熱淀粉芽孢桿 維丁

竹喙球 巴他賽

香草蘭根疾 咖啡

根瘤 絹毛欖仁苷

鏈格孢 聚谷紫杉

紫棕炭團(tuán) 九里香酮

草莖點(diǎn)霉 焦性沒(méi)食子酸

黑曲霉 甲基查爾酮

醬油曲霉 環(huán)巴