非肽calpain抑制劑(PD150606)公司正在出售的產(chǎn)品：DTNBP1 /FITC 熒光標(biāo)記精神分裂癥易感因抗體IgG環(huán)己酮 99.8%
dUTPase/FITC 熒光標(biāo)記抗脫氧三核苷水解抗體IgGN,N-二酰 ≥99.8%
DVL1 /FITC 熒光標(biāo)記蓬亂蛋白1抗體IgG鄰二苯 98%
DVH/FITC 熒光標(biāo)記鴨病性肝炎抗體IgG二 AR,99.0%
FLAG Tag (N

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。
唐德鏈霉菌小鼠磷脂酰絲Anti-MRGPRE Antibody人胰島(INS)

孟氏假單胞菌兔p53Anti-MRGPRF Antibody人胰島(INS)

釀酒酵母大鼠磷化核因子κB抑制蛋白αAnti-MRC2 Antibody人C肽(C-Peptide)

楔孢犁頭霉人Toll樣受體9Anti-MRGPRE Antibody人C肽(C-Peptide)

大腸埃希氏菌兔Bcl-2相關(guān)X蛋白Anti-MRGPRF Antibody人絨毛膜促性腺激(HCG)

枯草芽孢桿菌枯草亞種植物磷脂酰甘油Anti-MRGPRX1 Antibody人絨毛膜促性腺激(HCG)

魯氏接合酵母小鼠磷甘油酯Anti-MRGPRX4 Antibody人絨毛膜促性腺激β(β-CG)

釀酒酵母人轉(zhuǎn)化生長因子β2Anti-MRGPRG Antibody人絨毛膜促性腺激β(β-CG)

釀酒酵母大鼠核因子κBAnti-MRGPRG Antibody人促黃體激(LH)

河北木霉人單核趨化蛋白4Anti-MRPL10 Antibody人促黃體激(LH)

四繞曲霉大鼠樹突狀表面特異性C型凝集-間黏附分子3結(jié)合整合分子Anti-MRGPRX4 Antibody人潑尼松龍(PS)

釀酒酵母兔阿霉Anti-MRPL11 Antibody人潑尼松龍(PS)

植物乳桿菌小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽Anti-MRPL12 Antibody人瘦(LEP)

損蘑菇紫色桿菌植物玉米索核苷Anti-MRPL12 Antibody人瘦(LEP)

斜臥青霉植物赤霉Anti-MRPL13 Antibody人苗條受體(LR/Ob-R)

靈芝(紅芝, 赤芝)兔基質(zhì)金屬蛋白2/明膠AAnti-MRPL16 Antibody人苗條受體(LR/Ob-R)

G蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白21抗體簇生離褶傘人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

受體相互作用蛋白激1抗體侵染鏈格孢大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

受體輔助蛋白1抗體竹針孢座囊菌人原位胰腺腺癌細(xì)胞

環(huán)指蛋白135抗體棒狀桿菌屬人肺鱗癌細(xì)胞
非肽calpain抑制劑(PD150606)新城疫病 1,7-Bis(4-hydroxyphenyl)hepta-4,

茄病鐮刀 1,6-二噁螺[4.5]-2-癸

牽牛鏈格孢 1,4,6-三羥基-5-甲氧基-7-異戊二烯基呫噸酮

德氏乳桿保加亞亞種 1,4,5,6-Tetrahydroxy-7,8-dipreny

綠毛殼擬毛梭孢變種 (Z)-Lachnophyllum lactone

貝形圓孢側(cè)耳 (2,4-Dihydroxyphenyl)acetonitril

天藍(lán)黃鏈霉 二乙酸-(+)-松脂酯

多根硬皮馬勃 (+)-Conocarpan

副豬嗜血桿 松脂-4-O-beta-D-吡喃葡萄糖苷

短密青霉 尼洛替星

棒彎孢 毛葉香茶菜丁

惡臭假單胞 2',6'-Dihydroxypinobanksin

枯草芽孢桿 15-Demethylplumieride

黃曲霉 葉下珠脂

石榴干腐病 商陸黃