RNA聚合酶抑制劑（Beclabuvir）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-p-Klf5/CKLF /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-SHIP2 (Tyr542)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,，繪制雙色散點圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。
熊果,；烏蘇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： L-Pipecolic acid HDHD2B蛋白抗體包裝5g

繡線菊（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Norvaline造血干特異性相關(guān)結(jié)合蛋白1抗體包裝10MG

溴東莨菪堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-tert-LeucineI類組織相容性H-2抗原D-Dalpha鏈抗體包裝1g

徐長卿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-TheanineHEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白5A蛋白抗體包裝5g

續(xù)斷（川續(xù)斷）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Theanine熱休克蛋白70抗體包裝1g

續(xù)斷苷A英文名稱： D-Glucuronic acid羥類固脫氫17β抗體（17β-HSD8）包裝5g

續(xù)斷苷B英文名稱： L(+)-allo-Threonine透明質(zhì)結(jié)合蛋白4抗體包裝250mg

玄參（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Lysine acetateA型流感病H5N1凝集抗體包裝100ml

旋覆花（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Cystine dimethyl ester dihydrochlorideA型流感病核衣殼蛋白抗體包裝100g

雪膽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： GSK-2636771A型流感病核衣殼蛋白抗體包裝500g

雪膽乙英文名稱： N-Cbz-L-threonine Benzyl EsterA型流感病核衣殼蛋白抗體包裝1g

雪上一支蒿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (+)-2-Methyl-L-serineB型流感病蛋白抗體包裝5g

雪上一枝蒿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 3,3-Diphenyl-L-alanine人類狀瘤病16-E7抗體包裝100g

血根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： α-Methyl-L-phenylalanine跨膜蛋白絲1抗體包裝25g

血竭(麒麟竭)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Aspartic acid dimethyl ester hydrochloride肺癌癌基因蛋白3抗體包裝5g

根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%落葉型天皰瘡抗體試劑盒1-咖啡酰奎寧;1-Caffeoylq

舟形毛殼Chaetomium│cymbiforme 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%,BR,可用于培養(yǎng)絡(luò)試劑盒康普瑞汀磷二鈉;Combretasta

酵母屬Saccharomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%;ATP競爭性PI3K和mTOR抑制劑輪狀病抗原試劑盒康普瑞汀;Combretastatin
RNA聚合酶抑制劑（Beclabuvir）異類葉升麻苷,；異毛蕊花糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

異蓮心（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

異綠原A(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

異綠原B(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

異綠原C(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

異羅漢果皂苷 VHuman

異芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

異牡荊(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

異南五味子木脂寧Human