DLK/MAP3K12抑制劑(GNE-3511)公司*的產(chǎn)品：MMP-9/Gelatinase B ELISA Kit 大鼠質(zhì)金屬蛋白9/明膠B1,，2-環(huán)己二 99%
TIMP-1 ELISA Kit 大鼠質(zhì)金屬蛋白抑制因子1化鋨 AR,99.95%
bFGF ELISA Kit 大鼠性成纖維生長(zhǎng)因子PLA300-T2（二層單扶手車板式 ）靜音推車 910(L)×600(W)mm

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：DLK/MAP3K12抑制劑(GNE-3511)

英文名稱：GNE-3511

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究,；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

副豬嗜血桿菌鋅指蛋白ZBTB8A抗體Anti-NFIC Antibody尼克酰-N-甲基轉(zhuǎn)移(NNMT)

小麥粉  水分,、灰分 鋅指蛋白916B抗體Anti-NFKB1 Antibody(PB0161)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核心信號(hào)1(ERN1)

豇豆慢生根瘤菌鋅指蛋白903抗體Anti-NFKB2 Antibody內(nèi)質(zhì)網(wǎng)肽2(ERAP2)

香菇鋅指蛋白923抗體Anti-NFKB2 Antibody內(nèi)脂(VF)

大腸埃希氏菌鋅指蛋白288抗體Anti-NFKB2 Antibody內(nèi)粘蛋白(EMCN)

玫瑰擬層孔菌鋅指蛋白185抗體Anti-NFKB2 Antibody(PB0160)內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制因子(Vaspin)

黃赭色鏈霉菌鋅指蛋白431抗體Anti-NFKBIA Antibody內(nèi)酰β2(LACTβ2)

球孢白僵菌鋅指蛋白379抗體Anti-NFKBIA Antibody(PB0303)內(nèi)酰β(LACTβ)

淡紫紫霉鋅指蛋白804A抗體Anti-NGF Antibody內(nèi)收蛋白3(ADD3)

葛氏沙雷氏菌鋅指蛋白693抗體Anti-NGF Antibody內(nèi)收蛋白2(ADD2)

產(chǎn)黃青霉鋅指蛋白ZBTB3抗體Anti-NGF Antibody內(nèi)收蛋白1(ADD1)

鴿痘病著絲粒ZWILCH蛋白抗體Anti-NFKBIB Antibody(PB0304)內(nèi)切核V(ENDOV)

霍氏分支桿菌鋅指蛋白57抗體Anti-NGF Antibody內(nèi)切核G(ENDOG)

小孢擬盤(pán)多毛孢鋅指蛋白717抗體Anti-NGFR Antibody內(nèi)皮脂肪(LIPG)

枯草芽孢桿菌鋅指蛋白370抗體Anti-NGFR Antibody內(nèi)皮型一氧化氮合(NOS3)

皺褶假絲酵母鋅指蛋白3抗體Anti-NHEJ1 Antibody內(nèi)皮粘附分子(ESAM)

食欲前體蛋白OX抗體枯草芽胞桿菌枯草亞種人成骨細(xì)胞提取物

轉(zhuǎn)錄因子OTX1抗體土生克雷伯氏菌人腎足突細(xì)胞提取物

轉(zhuǎn)錄因子OTX2抗體圣堡羅沙門(mén)氏菌人膀胱成纖維細(xì)胞提取物

轉(zhuǎn)錄因子OTX1+OTX2抗體阿貢納沙門(mén)氏菌人膀胱上皮細(xì)胞提取物
DLK/MAP3K12抑制劑(GNE-3511)植物乳桿 結(jié)晶亞硫酸鈉骨堿性磷酸Elisa

靈芝 無(wú)水硫酸鈉亮氨酸Elisa

串珠鐮孢 結(jié)晶硫酸鈉溶血Elisa

Corynebacterium trachiae 碳酸氫鈉類卟啉原氧化Elisa

牛分枝桿 無(wú)水碳酸鈉熱休克蛋白60Elisa

釀酒酵母 檸檬熱休克蛋白40Elisa

肺炎克雷伯氏 2-苯甲降鈣Elisa

皮落青霉 水合17α,20β-雙羥孕酮Elisa

扭曲毛殼 三乙二白介2Elisa

串珠鐮刀* 1，2-白介4Elisa

護(hù)岸植物紅樹(shù)桿 聚2000白介18Elisa

Ag11（蘑菇） 1,，2,，6-己三乙酰Elisa

慢生根瘤 十二生長(zhǎng)抑制Elisa

鏈霉 一縮二鈣粘蛋白Elisa

膠孢 新戊二半胱氨酸蛋白2Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜,。

6,、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻,。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8、結(jié)果分析

a,、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)