公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):GPR119激動(dòng)劑(APD597)
英文名稱(chēng):APD597
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
APD597是GPR119激動(dòng)劑,作用于hGPR119,EC50為46nM,可用于治療2型糖尿病。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):897732-93-3 別名:JNJ-38431055 純度:98.0% 分子式:C??H??N?O?S 分子量:479.55 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
枯草芽孢桿菌腺苷環(huán)化Gα蛋白/Gαs/olf抗體Human VCPIP1 ELISA Kit猴皮質(zhì)(COR)免疫試劑盒
毛栓孔菌周期蛋白G相關(guān)激抗體Human VEZT ELISA Kit猴尿微量白蛋白(ALB)免疫試劑盒
藍(lán)微褐鏈霉菌糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體Human VGLL4 ELISA Kit猴可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)免疫試劑盒
紫紅鏈霉菌環(huán)指蛋白27抗體Human CNDP1(Beta-Ala-His dipeptidase) ELISA Kit猴可溶性間粘附分子1(sICAM-1)免疫試劑盒
節(jié)桿菌透明質(zhì)結(jié)合蛋白1抗體Human VILIP 3 ELISA Kit猴抗肝膜抗體(LMA)免疫試劑盒
猴頭菌G蛋白偶聯(lián)受體激6抗體Human VMAT2 ELISA Kit猴精1(ARG1)免疫試劑盒
尖頂鹽單胞菌Rho GTP激活蛋白26抗體Human VMA21 ELISA Kit猴甲狀腺(T4)免疫試劑盒
嗜果黑星菌G蛋白α抑制蛋白1抗體Human VASH2(Vasohibin-2) ELISA Kit猴環(huán)磷腺苷(cAMP)免疫試劑盒
糞腸球菌生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6抗體Human VAMP4 ELISA Kit猴環(huán)磷鳥(niǎo)苷(cGMP)免疫試劑盒
努比鹵地?zé)o氧芽孢桿菌谷胱甘肽合成抗體Human VAMP5 ELISA Kit猴骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體2型(BMPR2)免疫試劑盒
草青霉血型糖蛋白δ抗體Human VAMP7/TI-VAMP ELISA Kit猴谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移A1(GSTA1)免疫試劑盒
卡伍爾鏈霉菌糖皮質(zhì)激誘導(dǎo)亮拉鏈蛋白抗體Human VANGL1 ELISA Kit猴肝炎病的受體1/腎損傷分子1/KIM1(HAVCR1)免疫試劑盒
擬胞囊菌γ-谷酰轉(zhuǎn)肽6抗體Human VAMP8 ELISA Kit猴分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌G基丁受體δ/GABAA Rδ抗體Human VANGL2 ELISA Kit猴催乳(PRL/LTH)免疫試劑盒
膠胞G基丁受體γ1/GABAA Rγ1抗體Human VAPA ELISA Kit猴促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒
美濃鏈霉菌磷化γ基丁γ2受體抗體Human TOP2B(DNA topoisomerase 2-beta) ELISA Kit猴促腎上皮質(zhì)激釋放激(CRH)免疫試劑盒
白色鏈霉菌Streptomyces│albus 質(zhì)量規(guī)格:>99.8%(GC)鉤吻;鉤吻堿
大孢綠僵菌=金龜子綠僵菌大孢變種Metarhizium│majarosporae 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué),≥99.9%鉤吻子
嗜冷桿菌(加詞待譯)Psychrobacter│piscatorii 質(zhì)量規(guī)格:多肽合成葫蘆E
GPR119激動(dòng)劑(APD597)左乙拉西坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Yeast extract腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1抗體包裝1mg
佐米曲普坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sodium carbonate anhydrous硫軟骨蛋白多糖3抗體包裝10g
佐匹克(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Fructose染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1抗體包裝25g
唑來(lái)磷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Riboflavin 5'-monophosphate sodium salt hydrate磷化轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體包裝1g
槲皮-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龍膽雙...英文名稱(chēng): EB, Ethidium bromide stock solution, 10 mg/mlETS相關(guān)蛋白71抗體包裝25g
(+)-兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Green-DNA Dye,SYBR Green I外胚層發(fā)育不良蛋白1抗體包裝5g
(+)-兒茶合物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-GlucoseETV3L蛋白抗體包裝5g
(+)松脂-β-D-吡喃葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Imidazole酪蛋白激受體B6抗體包裝1g
(-)-Holostyligone英文名稱(chēng): L(+)-Arabinose溶血磷脂受體蛋白1抗體包裝5g
(-)-丁香樹(shù)脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→...英文名稱(chēng): Formamide deionized溶血磷脂受體蛋白2抗體包裝1g
(-)-丁香樹(shù)脂酚-4-O-β-D-葡萄糖苷英文名稱(chēng): Paraffin oil, light fraction溶血磷脂受體蛋白3抗體包裝5g
(2R)-5,7-二氧基二氫黃英文名稱(chēng): Potassium acetate內(nèi)皮的分化蛋白6抗體包裝1g
(2R,3R)-3,7,4'-三羥基-5-氧基-8-...英文名稱(chēng): Sodium acetate, anhydrate外生性骨疣樣蛋白2抗體包裝5g
(2R,3S)-3,7,4'-三羥基-5-氧基-8-...英文名稱(chēng): Agarose, low gelling temperature磷化eIF4E結(jié)合蛋白抗體包裝1g
(7S,7'R)-雙(3,4-亞二氧基)-rel-...英文名稱(chēng): Potassium phosphate, monobasic, anhydrous磷化eIF4E結(jié)合蛋白抗體包裝25g