公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:NO synthase抑制劑(L-Canavanine sulfate)
英文名稱:L-Canavanine sulfate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
L-Canavanine sulfate是誘導型NO合酶(NO synthase)的選擇性抑制劑,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:2219-31-0 純度:98.0% 分子量:274.25 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
血小板反應蛋白(THBS1)ELISA Kit英文名稱:THBS1 ELISA Kit色CYP3A抗體包裝25g
血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA Kit英文名稱:TM ELISA Kit色cP450 CYP20A1抗體包裝5g
血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)ELISA Kit英文名稱:SAA2 ELISA Kit色cP4501B1抗體包裝1g
血清淀粉樣P物質(zhì)(SAP)ELISA Kit英文名稱:SAP ELISA Kit色cP450 CYP26A1抗體包裝5g
血紅氧合2(HO2)ELISA Kit英文名稱:HO2 ELISA Kit磷化周期E抗體包裝100mg
血紅氧合1(HO1)ELISA Kit英文名稱:HO1 ELISA Kit磷化周期E2抗體包裝5g
血紅蛋白(HB)ELISA Kit英文名稱:HB ELISA Kit周期M3抗體包裝1g
血管抑(ANG)ELISA Kit英文名稱:ANG ELISA Kit周期Y/X抗體包裝250mg
血管性血友病因子(vWF)ELISA Kit英文名稱:vWF ELISA Kit磷化周期D3抗體包裝1g
血管細胞粘附分子1(VCAM1)ELISA Kit英文名稱:VCAM1 ELISA Kit色b5還原3抗體包裝1g
血管生成樣蛋白7(ANGPTL7)ELISA Kit英文名稱:ANGPTL7 ELISA KitCWC22蛋白抗體包裝250mg
血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA Kit英文名稱:ANGPTL3 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框95抗體包裝5g
血管生成樣蛋白2(ANGPTL2)ELISA Kit英文名稱:ANGPTL2 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框67抗體包裝10MG
血管生成樣蛋白1(ANGPTL1)ELISA Kit英文名稱:ANGPTL1 ELISA Kit磷化酪蛋白激1γ1+γ2+γ3抗體包裝100ml
血管生成4(ANGPT4)ELISA Kit英文名稱:ANGPT4 ELISA Kit原卟啉氧化3抗體包裝25ml
ADP核糖基化因子結合蛋白抗體泛交叉反應蛋白(UCRP)N/A
NO synthase抑制劑(L-Canavanine sulfate)四乙二乙烯
萜品油烯
溴乙烯
氧化環(huán)己烯
乙烯
乙氧乙烯
異丁乙烯
異杜烯
異戊乙烯