HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑（MK-5172）公司*的產(chǎn)品：Anti-IL-31/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素31抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-TGF- Beta1/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記TGF-β1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Anne

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑（MK-5172）

英文名稱：MK-5172 hydrate

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二,、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

馬尿泡（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ALLYL-BETA-D-GALACTOPYRANOSIDEMyc基因相關(guān)X因子抗體包裝25mg

馬錢苷,；馬錢子苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 2-Aminocyclohexanol  凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體包裝1g

馬錢苷(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Y27632NFKB激活蛋白1抗體包裝250mg

馬錢子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ganoderic acid A磷化Myc基因相關(guān)X因子抗體包裝25g

螞蟻(棕褐蟻)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Daurisoline亞基四氫葉還原MTHFR抗體包裝5g

買麻藤(小葉買麻藤）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-(Bromomethyl)naphthaleneMEK1/MAPKK1抗體(N-端)包裝1g

麥冬（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl hydrogenphosphate褪黑受體1B抗體包裝1g

麥冬苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基（1→2）-β-...英文名稱： 2,6-Dichloropurine多藥耐藥相關(guān)蛋白4抗體包裝5g

麥冬內(nèi)酯A英文名稱： 2,4-Dichloroquinazoline多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體包裝1g

麥冬皂苷D英文名稱： 9-(Chloromethyl)anthracene線粒體內(nèi)膜蛋白抗體包裝1g

麥冬皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ethyl ferulate基質(zhì)金屬蛋白-8/膠原2抗體包裝1g

麥冬皂苷D（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： CAPS基質(zhì)金屬蛋白11抗體包裝250mg

麥角甾,；麥角固(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Crotonoside基質(zhì)金屬蛋白-12抗體包裝25g

麥芽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Brazilin基質(zhì)金屬蛋白-15抗體包裝5g

滿山白（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sarsasapogenin基質(zhì)金屬蛋白-16抗體包裝100g

涅斯特連科氏菌Nesterenkonia│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%抗可提取核抗原抗體試劑盒1,5-O-二咖啡酰奎寧;Cynari

高氏鏈霉菌Streptomyces│goshikiensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%抗可溶性肝抗原抗體試劑盒1,，8-二羥基蒽醌;1,8-Dihydr

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：BS抗菌肽LL-37 ELISA Kit二氫丹參Ⅰ;Dihydrotanshi
HCV NS3/4a蛋白酶抑制劑（MK-5172）整合相關(guān)蛋白CD47舒尼替尼 Clotrimazole

磷化角蛋白8抗體順鉑 Colchlcine

鈣結(jié)合蛋白D28K抗體司莫司汀 Colchlcine

磷化接頭蛋白CrkL抗體他克莫司 Colistin Sulphate

磷化接頭蛋白CrkL抗體他米巴羅汀 Colistin Sulphate

促上腺皮質(zhì)釋放激受體1抗體坦度替尼;MLN518 Eflornithine HCl

磷化絲切蛋白抗體坦西莫司,， 西羅莫司脂化物 Cromolyn sodium

皮層肌動(dòng)蛋白抗體替拉替尼 Cromolyn sodium

促上腺皮質(zhì)釋放激受體2抗體替莫唑 Cyclosporine A 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜,。

6,、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻,。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8、結(jié)果分析

a,、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值,，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)