CDK1-cyclinB復合體和GSK-3抑制劑公司*的產(chǎn)品：EJ/GlyRS(Human EJ-antibody) ELISA Kit 人EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成抗體沙氏瓊脂培養(yǎng) BR
Human LDL-IC ELISA Kit 人低密度脂蛋白免疫復合物山梨麥康凱瓊脂礎(chǔ) BR
PCNA(Human proliferating cell nuclear antigen antib

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：CDK1-cyclinB復合體和GSK-3抑制劑

英文名稱：BIO

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核,、染色體以及基因表達的研究,；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究,；

④細胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細胞分化及其調(diào)控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細胞的起源與進化,；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；

5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；

6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

墳墓節(jié)桿菌磷化核因子抗體Human ORM1(Alpha-1-acid glycoprotein 1) ELISA Kit巨噬替代激活相關(guān)化學因子1(AmAC-1)

賴芽孢桿菌磷化核因子抗體Human NOS2/iNOS(Nitric oxide synthase, inducible) ELISA Kit巨噬趨化因子(MCF)

三葉草根瘤菌磷化核因子抗體Human TNNI1(Troponin I, slow skeletal muscle) ELISA Kit巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)

賴芽胞桿菌屬神經(jīng)上皮轉(zhuǎn)化基因1抗體Human IL7R(Interleukin-7 receptor) ELISA Kit巨噬集落激因子受體(M-CSFR)

擬盤多毛孢粘附分子3抗體（脊髓灰質(zhì)炎病受體相關(guān)蛋白3）Human LGALS1(Galectin-1) ELISA Kit巨噬集落激因子(M-CSF)

根霉屬螺旋環(huán)螺旋蛋白2抗體Human FABP1(Fatty acid-binding protein, liver) ELISA Kit巨噬激蛋白(MSP)

球孢白僵菌胚胎發(fā)育相關(guān)蛋白Nodal抗體Human MAP2K1(Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 1) ELISA Kit鹽抵抗的性磷(TRAP)

地衣芽孢桿菌增殖相關(guān)蛋白NANOS1抗體Human IL36G(Interleukin-36 gamma) ELISA Kit相關(guān)抗原7(SPAG7)

毛韌革菌同源盒蛋白NOBOX抗體Human SNCA(Alpha-synuclein) ELISA Kit精脒/精N(1)-乙酰轉(zhuǎn)移樣蛋白1(SATL1)

微球菌轉(zhuǎn)錄因子NAC1抗體Human PTK2(Focal adhesion kinase 1) ELISA Kit精合成(SRM)

產(chǎn)氣莢膜梭菌       C型神經(jīng)生長因子受體抗體Human ENPP2(Ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase family member 2) ELISA Kit精酰-tRNA合成(RARS)

根瘤菌磷化KB抑制蛋白激εHuman PSG1(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 1) ELISA Kit精脫羧(ADC)

耐鹽四聯(lián)球菌磷化神經(jīng)纖毛蛋白1抗體Human NPY(Pro-neuropeptide Y) ELISA Kit精2(ARG2)

紫薇布勒酵母1型神經(jīng)纖維瘤抗體Human SERPINC1(Antithrombin-III) ELISA Kit精(Arg)

香菇磷化1型神經(jīng)纖維瘤抗體Human TNNI2(Troponin I, fast skeletal muscle) ELISA Kit精加壓(AVP)

枯草芽胞桿菌枯草亞種中心粒蛋白Nudel抗體Human S100B(Protein S100-B) ELISA Kit精(Arg)

: ivcas7.00198資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR槐果堿

: LMG5856=ATCC33914=CECT547=DSM3584=ICMP4298=NCPPB2217資源名稱: Xylophilusampelinus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR絡塞定

茯苓Poria│cocos 質(zhì)量規(guī)格：BR,，4000u/g絡緦
CDK1-cyclinB復合體和GSK-3抑制劑蘋果殼囊孢 1640液體培養(yǎng)基血清淀粉樣蛋白AElisa

栗疫 溴酚紅結(jié)合珠蛋白,；觸珠蛋白Elisa

霍亂弧 DMEM高糖液體培養(yǎng)基維生B12Elisa

大禿馬勃* 2-氟-5-甲溶Elisa

繩狀籃狀 (R)-3-吡咯烷Beclin1Elisa

長裙竹蓀 異喹啉-5-磺酸微管相關(guān)蛋白輕鏈3IIElisa

嗜熱脂肪地芽孢桿 三氟甲磺酸基硅酯p62Elisa

雜色曲霉原變種 3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮脂肪Elisa

 米曲霉 豬膽粉α-淀粉Elisa

野土地桿 1-(2-氨基乙基)胰蛋白Elisa

中瀨擲孢酵母 1-氨基-1-環(huán)己酸分泌型球蛋白AElisa

金黃殼囊孢 酸水解酪蛋白（酪蛋白氨基酸）促腎上腺皮質(zhì)Elisa

谷氨酸棒桿 基硅乙酸酯輪狀病Elisa

大團囊蟲草 牛膽粉瘦Elisa

蕈狀芽孢桿 四苯基溴化膦饑餓Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小,，細胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜,。

6,、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻,。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8,、結(jié)果分析

a,、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細胞）,，各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細胞的OD 值,，C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)