公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):PLK4抑制劑(Centrinone-B)
英文名稱(chēng):Centrinone-B
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Centrinone-B是一種高親和的選擇性PLK4抑制劑(Ki=0.59nM),。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1798871-31-4 純度:98.58% 分子量:631.67 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
Streptomyces flavovariabilis鋅指蛋白473抗體Anti-NEDD4L Antibody鎳紋蛋白(METRN)
居白蟻菌AN1型鋅指蛋白5抗體Anti-NEDD8 Antibody脲酰β(UPβ1)
釀酒酵母鋅指蛋白146抗體Anti-NEDD9 Antibody尿調(diào)蛋白(UMOD)
黑靈芝鋅指蛋白23抗體Anti-NEDD4 Antibody尿鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(URAT1)
兩粵黃檀根瘤菌NFκB激活蛋白205抗體Anti-NELFB Antibody尿溶蛋白3B(UPK3B)
灰藤黃鏈霉菌鋅指蛋白321B抗體Anti-NES Antibody(PB0920)尿溶蛋白3A(UPK3A)
南方散斑殼鋅指蛋白297抗體Anti-Neurotrophin 3/NTF3 Antibody尿溶蛋白2(UPK2)
瓜類(lèi)*鋅指蛋白ZBTB12抗體Anti-NES Antibody尿溶蛋白1B(UPK1B)
中國(guó)臺(tái)灣根霉負(fù)調(diào)控因子白介2抗體Anti-Nephrin(NPHS1) Antibody尿溶蛋白1A(UPK1A)
盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體Anti-Neuroglobin(NGB) Antibody尿皮質(zhì)3(UCN3)
鐘器腐霉磷化ZCWCC1抗體Anti-NF2(Merlin) Antibody尿皮質(zhì)2(UCN2)
黃曲霉鋅指蛋白598抗體Anti-NF2 Antibody尿皮質(zhì)1(UCN1)
產(chǎn)紫青霉鋅指蛋白537抗體Anti-NFAT5 Antibody尿囊(ALLC)
炭黑曲霉ZSWIM3蛋白抗體Anti-NF1 Antibody尿嘧啶磷核糖轉(zhuǎn)移(UPRT)
噬瓊脂鏈卵菌E3泛蛋白連接ZSWIM2抗體Anti-NFATC1 Antibody尿嘧啶核苷磷化2(UPP2)
葡萄座腔菌鋅指/環(huán)指蛋白4抗體Anti-NFATC1 Antibody尿嘧啶DNA糖基化(UNG)
卵巢癌免疫反應(yīng)抗原抗體頭狀葡萄球菌頭狀亞種人肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
口腔癌高表達(dá)的蛋白1抗體最小弧菌人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞提取物
氧化固結(jié)合蛋白4抗體腸沙門(mén)氏菌腸亞種傷寒血清型人呼吸道上皮細(xì)胞提取物
抗細(xì)胞凋亡蛋白OLFM44抗體鴨沙門(mén)氏菌人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞提取物
PLK4抑制劑(Centrinone-B)四川散斑殼 2-羥基吡啶成纖維生長(zhǎng)因子23Elisa
檸檬明串珠 三氟乙酰酮辣椒受體5Elisa
野油菜黃單胞棲青莧致病變種 2-氟苯乙酮飽和脂肪酸Elisa
科羅拉多擬無(wú)枝酸 二苯甲酮過(guò)氧化物Elisa
Brenneria salicis 芐酮維生EElisa
新疆交替紅色桿 苯乙酮雪卡Elisa
Lonsdalea quercina subsp. quercina 異佛爾酮空泡Elisa
局限曲霉 硅酸鈉甲狀腺受體αElisa
頭孢霉屬 無(wú)水磷酸鈉甲狀腺受體βElisa
叢赤殼屬 原釩酸鈉甲狀腺球蛋白Elisa
矩圓黑盤(pán)孢 亞硝基鐵化鈉組織蛋白BElisa
葡萄座腔 三偏磷酸鈉7-芐氧基-4-三氟甲基-脫芐基Elisa
白色假絲酵母* 偏磷酸鈉αS轉(zhuǎn)移Elisa
根瘤 偏酸鈉膜攻擊復(fù)合物Elisa
假單胞 偏重亞硫酸鈉球蛋白Elisa