JAK2和JAK3抑制劑(AT9283)公司*的產(chǎn)品：ANA(Human nucleolus antibody) ELISA Kit 人抗核仁抗體高氏合成1號(hào)瓊脂培養(yǎng) BR
gp210(Human glucoprotein 210) ELISA Kit 人抗核膜糖蛋白210抗體HE瓊脂 BR
LC1(Human liver cytosolantibody type 1) ELISA Ki

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：JAK2和JAK3抑制劑(AT9283)

英文名稱：AT9283

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究,；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二,、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

鹽古桿菌黑色瘤相關(guān)抗原B3抗體Human NUCB2(Nucleobindin-2) ELISA Kit人抗人絨毛膜促性腺激抗體(AhCGAb)

布魯氏菌 生物Ⅱ型鋅指蛋白801抗體Human RLN3(Relaxin-3) ELISA Kit人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)

中性彎曲嗜菌NDUFS2抗體Human IL5RA(Interleukin-5 receptor) ELISA Kit人抗浦肯野抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)

產(chǎn)朊假絲酵母NDUFAF4抗體Human S100A16(Protein S100-A16) ELISA Kit人抗平滑肌抗體(ASMA)

黑木耳分化相關(guān)基因NDRG1抗體Human ELANE(Neutrophil elastase) ELISA Kit人抗皮膚抗體(ASA)

中慢生華癸根瘤菌神經(jīng)降壓抗體Human RRM1(Ribonucleoside-diphosphate reductase large subunit) ELISA Kit人抗凝血抗體(aPT1/aPT2)

殺鮭氣單胞菌核受體輔助抑制因子2抗體Human PSG3(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 3) ELISA Kit人抗凝血受體(ATR)

黃色短桿菌核仁磷蛋白抗體Human IL5RA(Interleukin-5 receptor) ELISA Kit人抗凝血III(AT III)

大腸埃希氏菌嗜中性粒胞漿因子4抗體Human NUCB2(Nucleobindin-2) ELISA Kit人抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)

蘑菇輪枝孢磷化核因子NF-κB p65抗體Human S100A16(Protein S100-A16) ELISA Kit人抗凝血Ⅲ(ATⅢ)

*勝利油田熱微球菌磷化一氧化氮合成3（內(nèi)皮型）抗體Human RLN3(Relaxin-3) ELISA Kit人抗釀酒酵母抗體(ASCA)

黑曲霉核抑制蛋白磷1抗體Human FABP4(Fatty acid-binding protein, adipocyte) ELISA Kit人抗內(nèi)因子抗體(IFA)

異配囊接霉NCK銜接蛋白1抗體Human IL9(Interleukin-9) ELISA Kit人抗內(nèi)皮抗體(AECA)

熱帶鹽水孢菌α-中連蛋白抗體Human RRM1(Ribonucleoside-diphosphate reductase large subunit) ELISA Kit人抗腦組織抗體(ABAb)

大腸桿菌核受體Rev-Erbα抗體Human LAMA1(Laminin subunit alpha-1) ELISA Kit人抗苗勒管激(AMH)

Wautersiella falsenii性受體NK-p44抗體Human PDGFRA(Alpha-type plaet-derived growth factor receptor) ELISA Kit人抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體(AGA)

副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質(zhì)量規(guī)格：BR,4000u/g落新婦苷

假交替單胞菌Pseudoalteromonas│tetraodonis 質(zhì)量規(guī)格：BR,100 U/mg羅通定

鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格：BR,75U/MG鹽基葡萄糖
JAK2和JAK3抑制劑(AT9283)大斑凸臍蠕孢 S-芐基-L-半胱氨酸白介1受體拮抗劑Elisa

枯草芽孢桿枯草亞種 2--6-甲基煙酸乳清蛋白Elisa

葡萄座腔 內(nèi)消旋-2,3-二巰基丁二酸結(jié)核病Elisa

短小芽孢桿 2-噻吩乙β2微球蛋白Elisa

菊池鏈格孢 1-（2-）β-乳球蛋白Elisa

鏈球(不定種) 2-溴噻唑環(huán)磷酸腺苷Elisa

大腸埃希氏桿 膽固油酸酯乳房鏈球Elisa

蠟樣芽孢桿 3,5-二苯腫瘤壞死因子γElisa

羅倫隱球酵母羅倫變種 3-溴-4-甲基噻吩β干擾Elisa

谷氨酸棒桿 N,N,N',N'',N''-五甲基二乙烯基三細(xì)粒棘球絳蟲抗體Elisa

癭青霉 3,4-二苯甲酰β內(nèi)酰Elisa

釀酒酵母 哌-2-羧酸牛血清白蛋白Elisa

頂青霉 油酸酰神經(jīng)元烯化Elisa

白靈側(cè)耳 3,5-二甲基異噁唑皮質(zhì)酮;腎上腺酮Elisa

干酪乳桿 烯苯S100B蛋白Elisa 

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2,、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3,、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí),，使MTT 還原為甲臜。

6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻,。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8,、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)