商品介紹:
Testolactone是一種芳香酶抑制劑,是一種合成的抗腫瘤劑,。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:968-93-4 純度:95.0% 分子量:300.39 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水),。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞,。
對于貼壁細胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細胞,共洗滌兩次,。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),,PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,,活細胞僅有很低強度的背景熒光,,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞,,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
大腸埃希氏菌Pseudomonas aeruginosa大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)
可可鏈霉菌可可亞種Pseudomonas aeruginosa大鼠髓過氧化物(MPO)
生孢梭菌Pseudomonas aeruginosa大鼠髓過氧化物(MPO)
蘋果雙殼菌Pseudomonas aeruginosa大鼠顆粒B(Gzms-B)
嗜果刀孢Pseudomonas alcaligenes大鼠顆粒B(Gzms-B)
腸膜明串珠菌Pseudomonas alcaligenes大鼠顆粒A(Gzms-A)
Cellulomonas carbonisPseudomonas alcaligenes大鼠顆粒A(Gzms-A)
黃暗青霉Pseudomonas alcaligenes大鼠淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)
釀酒酵母Pseudomonas aeruginosa大鼠淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)
紡錘形毛殼Pseudomonas alcaligenes大鼠末端補體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)
平田頭菇10-3Pseudomonas alcaligenes大鼠末端補體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)
大腸埃希氏菌Pseudomonas alcaligenes大鼠補體蛋白4(C4)
圍小叢殼菌Pseudomonas anguilliseptica大鼠補體蛋白4(C4)
斯氏普羅威登斯菌Pseudomonas alcaligenes大鼠腎(Renin)
華根霉Pseudomonas chlororaphis大鼠腎(Renin)
耐熱錢斯氏酵母Pseudomonas chlororaphis大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)
帕金蛋白抗體鐮刀菌人臍帶間充質(zhì)干細胞(MSC)(干細胞庫保藏)
粘著斑激抗體橙色串珠霉人骨髓間充質(zhì)干細胞(MSC)(干細胞庫保藏)
P73腫瘤抑制基因抗體產(chǎn)氮假單胞菌超氧化物歧化(SOD)分型測試盒(羥胺法)
配對盒基因7抗體膠狀溶桿菌基轉(zhuǎn)移(ALT/GPT)比色法測試盒(賴氏法)
芳香酶抑制劑(Testolactone)魯氏接合酵母 烯葡聚糖凝膠S-100 HR
猴頭 高烏甲
大腸埃希氏 瓊脂糖凝膠CL-2B
土壤谷桿 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)
煙灰褐絲膜 長春新堿
聚紅粉端孢霉 瓊脂糖凝膠CL-4B
類芽胞桿 硫酸長春新堿
釀酒酵母 瓊脂糖凝膠CL-6B
節(jié)桿 硫酸長春質(zhì)堿
解脂假絲酵母 瓊脂糖凝膠6FF
枯草芽孢桿 西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂
氟乙酰速測管 肝瓊脂糖凝膠6FF
地衣芽孢桿(備貨期15到25個工作日) 長春質(zhì)堿
土曲霉 紅色瓊脂糖凝膠6FF
解藻酸弧 長春堿