HIV-1抑制劑(Betulinic acid)公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-Cytokeratin 17 (Ser44) /FITC 熒光標(biāo)記化角蛋白17抗體IgG硅烷 97%
CK18/FITC 熒光標(biāo)記角蛋白18抗體IgG異喹啉-5-磺 95%
CK18(C-term) /FITC 熒光標(biāo)記角蛋白18抗體（C端）IgG2-琥珀 99%
CK18/FITC 熒光標(biāo)記角蛋白18抗

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán),。
天藍(lán)褐鏈霉菌熒光標(biāo)記人IgMAnti-HLA-DOB Antibody人抗肝腎微粒體抗體(LKM)

腐臭假單胞菌熒光標(biāo)記人IgAAnti-HLA-H Antibody人抗肝腎微粒體抗體(LKM)

德巴酵母屬熒光標(biāo)記猴IgGAnti-HLA-DPA1 Antibody人抗α干擾抗體(IFNα-Ab)

釀酒酵母熒光標(biāo)記猴IgMAnti-HLX Antibody人抗α干擾抗體(IFNα-Ab)

棲土曲霉熒光FITC標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-HLA-H Antibody人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)

固氮紅細(xì)菌熒光標(biāo)記小鼠IgMAnti-HLA-DQB1 Antibody人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)

釀酒酵母熒光標(biāo)記豬IgGAnti-HLX1 Antibody人Jo1抗體/抗組酰tRNA合成抗體(Jo1/HRS)

大麗花輪枝孢（棉花黃萎病菌）熒光標(biāo)記水貂IgGAnti-HLX Antibody人Jo1抗體/抗組酰tRNA合成抗體(Jo1/HRS)

藤黃微球菌熒光標(biāo)記兔IgMAnti-HMG14 Antibody人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)

頭葡萄球菌頭亞種熒光FITC標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對照)Anti-HMGA2 Antibody人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)

殼囊孢屬熒光標(biāo)記大鼠IgMAnti-HMG20B Antibody人抗天然脫氧核糖核抗體(n-DNA-Ab)

細(xì)交鏈孢熒光標(biāo)記重組人白介-1受體拮抗劑Anti-HMGN2 Antibody人抗天然脫氧核糖核抗體(n-DNA-Ab)

異常畢赤酵母熒光標(biāo)記血藍(lán)蛋白Anti-HNRCL Antibody人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)

枯草芽孢桿菌熒光標(biāo)記人血白蛋白Anti-hnRNP K Antibody人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)

皮諾氏菌熒光標(biāo)記胰糜蛋白Anti-HMGXB3 Antibody人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)

桃色枝頂孢Anti-hnRNP K Antibody人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)

電壓門控鈉通道SCN3α蛋白/Na+CPtypeIIIα抗體島青霉人腎透明細(xì)胞腺癌

細(xì)胞周期蛋白SG2N抗體園弧青霉=桔灰青霉小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞（VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá)）

STRN4蛋白抗體頂青霉人結(jié)腸腺癌細(xì)胞

PSD95結(jié)合蛋白1抗體黃綠青霉C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
HIV-1抑制劑(Betulinic acid)淺黃隱球酵母 碳酸銀

紅球 溴化銀

釀酒酵母 酸性氧化鋁

青霉屬 酸性氧化鋁

蘇云金芽孢桿 酸性氧化鋁

海綿假單胞 酸性氧化鋁

根瘤 酸性氧化鋁

肉梭 C型 酸性氧化鋁

莓形炭團(tuán) 

杰氏假單胞 硫酸鋁

釀酒酵母 8(14),15-異海松二烯-3,18-二

芽胞桿 8(14),15-Isopimaradien-3-ol

熒光假單胞 7Alpha-羥基豆甾

巨枝膝梗霉 7-異戊烯氧基-gamma-花椒堿

干酪乳桿 6-O-香草酰基筋骨草