商品介紹:
Cinacalcet是一種可Ca receptor(CaR)激動(dòng)劑,用于治療心血管疾病,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):226256-56-0 別名:AMG 073 純度:99.65% 分子量:357.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)),。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),,PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
鹽尼莫司汀英文名稱(chēng): Decitabine10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框47抗體包裝25g
鹽諾拉曲噻英文名稱(chēng): Decitabine10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框81抗體包裝500g
鹽柔紅霉英文名稱(chēng): 5-Aza-2′-deoxycytidine19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框47抗體包裝100g
鹽替吡嘧啶英文名稱(chēng): Deslorelin Acetate19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體包裝25g
鹽托烷司瓊英文名稱(chēng): Deressin AcetateN-乙酰半乳糖糖蛋白3,、β-半乳糖轉(zhuǎn)移1抗體包裝5g
鹽伊達(dá)比星英文名稱(chēng): Mupirocin19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框18抗體包裝100ml
氧;奧替拉西英文名稱(chēng): Tert-buthyl Pitavastatin19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框21抗體包裝25ml
伊立替康英文名稱(chēng): Docetaxel anhydrous19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體包裝5ml
伊立替康(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Docetaxel anhydrousⅡ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體包裝100g
伊馬替尼英文名稱(chēng): Docetaxel trihydrate皮質(zhì)1抗體包裝25g
依克立達(dá)英文名稱(chēng): Docetaxel trihydrate8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框70抗體包裝5g
依克立達(dá)鹽鹽英文名稱(chēng): Donepezil HCl胰羧肽E抗體包裝25g
依魯替尼(PCI32765)英文名稱(chēng): Donepezil HCl磷化角蛋白18抗體包裝5g
依維莫司英文名稱(chēng): Doramapimod20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框112抗體包裝25mg
依西美坦英文名稱(chēng): Dorzolamide HCl10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框88抗體包裝1g
廈門(mén)鏈霉菌Streptomyces│xiamenensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)胰島受體α試劑盒鹽蘇堿;Stachydrine hy
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胰島降解試劑盒異阿魏;3-Hydroxy-4-met
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%胰島試劑盒鳶尾苷元磺鈉;tectorigenin
CaR激動(dòng)劑(Cinacalcet)微小染色體維持缺陷蛋白7抗體龍血竭(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole
E3泛連接MUL1抗體龍血A(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole
纖微絲相關(guān)糖蛋白2抗體龍芽楤木(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole
肥大類(lèi)糜蛋白1抗體龍眼肉(標(biāo)準(zhǔn)品) 3-Quinuclidinone HCl
硝唑單克抗體漏蘆(祁州漏蘆)(標(biāo)準(zhǔn)品) Irsogladine
線粒體核糖體蛋白L12抗體蘆丁/蕓香葉苷(標(biāo)準(zhǔn)品) ADA monosodium salt
線粒體核糖體蛋白L39蘆根(標(biāo)準(zhǔn)品) ADA disodium salt
脫氫激1抗體蘆薈(好望角蘆薈)(標(biāo)準(zhǔn)品) ADA
絲裂原活化的蛋白激p38β抗體蘆薈大黃(標(biāo)準(zhǔn)品) (S)-N-Fmoc-2-(4'-pentenyl)alanine