谷氨酰胺酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑（Azaserine）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-OCT1 /FITC 熒光素標(biāo)記陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)器1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗羊IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
周期素依賴性激酶5抗體 Anti-CDK5 1ml
Goat

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

棲藻海桿狀菌Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae

紫荊假諾氏菌Candida guilliermondii

佛雷德里克斯堡假單胞菌Saccharomyces cerevisiae

棕灰口蘑Candida kefyr

嗜油假單胞菌Saccharomyces cerevisiae

大腸埃希菌Candida valida

土星擬威爾酵母Pichia farinosa

蘇云金芽孢桿菌Pichia farinosa

小單孢菌Pichia membranifaciens

香菇*Saccharomyces cerevisiae

阿木吉氏鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae

太湖類芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae

脆弱擬桿菌Saccharomyces cerevisiae

絳紅褐游動放線菌Saccharomyces bayanus

米曲霉Saccharomyces cerevisiae

小鼠髓樣分化因子88(MyD88)免疫試劑盒心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體人嗜鉻蛋白A(CgA) 黃芪甲苷

小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體人嗜鉻蛋白A(CgA) 黃芪皂苷I

小鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體 免疫試劑盒抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體人視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(pRB) 黃芪皂苷II

小鼠髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體人視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(pRB) 黃芪皂苷III
谷氨酰胺酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑（Azaserine）SCN8A 英文名稱： 鈉通道蛋白8α抗體 0.1ml

Anei-ENPP2 英文名稱： 自分泌運(yùn)動因子抗體 0.1ml

肺表面活性蛋白B抗體 Anti-SP-B 0.1ml

Anti-TGM3/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)谷氨酰酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAP4K4(Ser629) 磷酸化原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 規(guī)格 0.1ml

phospho-ATF2(pSer490/pSer498) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg