PI3K抑制劑(GDC-0077)公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-SirT1 (Ser47) /FITC 熒光標(biāo)記化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體IgG
Phospho-SirT1 (Ser27)/FITC 熒光標(biāo)記化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體IgG
Skp2/FITC 熒光標(biāo)記S相激相關(guān)蛋白抗體IgG
SLC4A4/FITC 熒光標(biāo)記碳氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A4抗體IgG
Slc4a7/Nbcn1 /FI

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞,，500-1000g離心5min收集細胞,。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細胞，共洗滌兩次,。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,，活細胞僅有很低強度的背景熒光,，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞,，細胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán),。
豇豆慢生根瘤菌Pseudomonas aeruginosa大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)

花楸盤多毛孢Pseudomonas aeruginosa大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)

靈芝(紅芝，赤芝)Pseudomonas aeruginosa大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)

氏針層孔菌Pseudomonas aeruginosa大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)

釀酒酵母Pseudomonas aeruginosa大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)

腸沙門氏菌腸亞種邁阿密血清型Pseudomonas aeruginosa大鼠纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)

產(chǎn)紅青霉Pseudomonas aeruginosa大鼠纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)

基簡馬杜放線菌Pseudomonas aeruginosa大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)

尿腸球菌Pseudomonas aeruginosa大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)

褐紅小孔菌Pseudomonas aeruginosa大鼠游離脂肪(FFA)

蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種Pseudomonas aeruginosa大鼠游離脂肪(FFA)

平菇Pseudomonas aeruginosa大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)

托姆青霉Pseudomonas aeruginosa大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)

豌豆根瘤菌Pseudomonas aeruginosa大鼠骨粘連蛋白(ON)

黑曲霉Pseudomonas aeruginosa大鼠骨粘連蛋白(ON)

玉米乳桿菌Pseudomonas aeruginosa大鼠葉(FA)

P2Y1受體抗體/受體抗體極細鏈格孢人誘導(dǎo)型多能干細胞（iPS細胞）DYR0100（干細胞庫保藏）

腺苷環(huán)化激活肽-38抗體裂擬迷孔菌大鼠骨髓MSC間充質(zhì)干細胞（干細胞庫保藏）

蛋白活化受體4抗體外皮毛霉小鼠胚胎肌母細胞（2014年新引進）（未分化,，可誘導(dǎo)分化形成肌纖維）（干細胞庫保藏）

p21激活激4抗體星形擬盤多毛孢人類胚胎干細胞H1（干細胞庫保藏）
PI3K抑制劑(GDC-0077)泡盛曲霉 伊紅藍瓊脂(EMB)

根瘤 伽升沃 D

鏈霉 兩性電解質(zhì)

灰樹花* 伽升沃 C

膠質(zhì)芽孢桿 羥基磷灰石

香菇 鉤吻甲

水棲黃桿 乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基

斑點氣單胞 化銫

核果黑腐皮殼 鉤吻子

曲霉屬 疏水硅烷

馬賽 葫蘆E

巴氏醋桿 親和硅烷

松口蘑 乳糖復(fù)發(fā)酵培養(yǎng)基

釀酒酵母 分離液

假交替單胞 通關(guān)藤苷H