BRAF(V600E/WT)和c-Raf抑制劑（CEP-32496）公司*的產(chǎn)品：Phospho-SHIP2 (Tyr1135)/FITC 熒光標記化蛋白酪氨2抗體IgG
Phospho-SHIP2 (Ser576) /FITC 熒光標記化蛋白酪氨2抗體IgG
Phospho-SHIP2 (Tyr542)/FITC 熒光標記化蛋白酪氨2抗體IgG
Phospho-SHIP2 (Tyr9

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：BRAF(V600E/WT)和c-Raf抑制劑（CEP-32496）

英文名稱：CEP-32496

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究,；

②生物膜與細胞器的研究,；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細胞分化及其調(diào)控,；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化,；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二,、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；

2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；

5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

稻瘟病菌（都不提供）Pseudomonas aeruginosa大鼠鐵蛋白(FE)

衛(wèi)茅膏藥病Pseudomonas aeruginosa大鼠碳酐2(CA-2)

綠色木霉=木木霉Pseudomonas aeruginosa大鼠碳酐2(CA-2)

灰紫毛霉Pseudomonas aeruginosa大鼠色上皮衍生因子(PEDF)

波蘭青霉Pseudomonas aeruginosa大鼠色上皮衍生因子(PEDF)

嬰兒配方乳粉 ,、左旋肉堿,、?；恰⒓?/span> Pseudomonas aeruginosa大鼠解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)

杰氏假單胞菌Pseudomonas aeruginosa大鼠解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)

鹽古桿菌Pseudomonas aeruginosa大鼠抗(AT)

側(cè)耳Pseudomonas aeruginosa大鼠抗(AT)

耐寒短桿菌Pseudomonas aeruginosa大鼠胰島抗體(ICA)

紫色紅曲菌Pseudomonas aeruginosa大鼠胰島抗體(ICA)

短乳桿菌Pseudomonas aeruginosa大鼠腎損傷分子1(Kim-1)

乳酒假絲酵母Pseudomonas aeruginosa大鼠腎損傷分子1(Kim-1)

鹽沼鹽桿菌Pseudomonas aeruginosa大鼠抗單核抗體(AMA)

同合小克銀漢霉Pseudomonas aeruginosa大鼠抗單核抗體(AMA)

運動節(jié)桿菌Pseudomonas aeruginosa大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)

增殖細胞核抗原抗體生赤殼屬小鼠誘導(dǎo)型多能干細胞（iPS細胞）OSKM-1（干細胞庫保藏）

腺苷環(huán)化激活肽-27/38抗體互隔交鏈孢霉Wistar大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（干細胞庫保藏）

磷脂磷2C抗體瓜亡革菌人誘導(dǎo)型多能干細胞（iPS細胞）DYP0530（干細胞庫保藏）

配對盒基因1抗體細鏈格孢小鼠誘導(dǎo)型多能干細胞（iPS細胞）OSKZ-1（干細胞庫保藏）
BRAF(V600E/WT)和c-Raf抑制劑（CEP-32496）糙皮側(cè)耳 兩性電解質(zhì)

清酒假絲酵母 兩性電解質(zhì)

鱗貝云芝 7-乙氧基莫諾苷

枯草芽孢桿 兩性電解質(zhì)

金黃色葡萄球 兩性電解質(zhì)

山綠豆根瘤 11-O-羅漢果苷V

斯氏李斯特氏 兩性電解質(zhì)

海水希瓦氏 月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯（LST）

秦氏蜜環(huán) 二咖啡酰菊苣酸

微紫青霉 EC肉湯

人蒼白桿 兩性電解質(zhì)

大腸埃希 3,，4,，5-三咖啡酰奎寧酸

白地霉 5,7-二羥基色原酮

少根根霉戴爾變種 兩性電解質(zhì)

季也蒙畢赤酵母 兩性電解質(zhì) 

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目,，需根據(jù)細胞的大小,，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2,、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物,。

3、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時,，使MTT 還原為甲臜,。

6、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻。

7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8、結(jié)果分析

a,、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值,，C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)