產(chǎn)品屬性:
中文名稱:RAD51抑制劑(RI-1)
英文名稱:RI-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
RI-1是RAD51抑制劑,IC50在5到30μM之間,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:415713-60-9 純度:99.77% 分子量:361.61 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
谷棒桿菌熒光標(biāo)記豬胰島蛋白Anti-HGFAC Antibody人抗組蛋白抗體(AHA)
頭狀禿馬勃熒光標(biāo)記雞卵白蛋白Anti-HGH1 Antibody人抗組蛋白抗體(AHA)
綠黃鏈霉菌熒光FITC標(biāo)記兔IgG(流式同型對照)Anti-HGH1 Antibody人晶體蛋白α(Cryα)
Aeromonas aquariorum熒光標(biāo)記牛IgGAnti-HIBADH Antibody人晶體蛋白α(Cryα)
林生毛霉熒光標(biāo)記牛IgMAnti-HIF3A Antibody人晶體蛋白β(Cryβ)
澳型核果褐腐病菌熒光標(biāo)記雞IgGAnti-Hip Antibody人晶體蛋白β(Cryβ)
密歇根棍狀桿菌標(biāo)記亞種熒光標(biāo)記雞IgMAnti-HIF3A Antibody人抗膠原蛋白抗體(CLA)
甜菜慢生根瘤菌熒光標(biāo)記狗IgGAnti-HIPK4 Antibody人抗膠原蛋白抗體(CLA)
熱葡糖苷土芽孢桿菌熒光標(biāo)記狗IgMAnti-HIST1H2BH Antibody人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)
欽海特德沃斯氏菌熒光FITC標(biāo)記羊IgG(流式同型對照)Anti-HIST1H2BB Antibody人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)
枯草芽孢桿菌熒光標(biāo)記羊IgMAnti-HIST1H2BH Antibody人抗環(huán)胍肽抗體(CCP)
枯草芽胞桿菌枯草亞種熒光標(biāo)記豚鼠IgGAnti-HIRA Antibody人抗環(huán)胍肽抗體(CCP)
蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種熒光標(biāo)記豚鼠IgMAnti-Histone H3 Antibody人抗核周因子抗體(APF)
多粘類芽胞桿菌熒光標(biāo)記馬IgGAnti-HLA-DOA Antibody人抗核周因子抗體(APF)
長柄條孢牛肝熒光標(biāo)記馬IgMAnti-HK3 Antibody人抗核抗體(ANA)
乳桿菌屬熒光標(biāo)記人IgGAnti-HLA-DOA Antibody人抗核抗體(ANA)
紅細(xì)胞膜蛋白STOM抗體白腐菌人肝腹水腺癌細(xì)胞
鈉依賴性脯轉(zhuǎn)運(yùn)PROT抗體小刺青霉大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞
基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體產(chǎn)紫青霉人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞(白介21基因修飾)
鈉離子通道蛋白7α/Na+CPtypeVIIα抗體淡紫青霉人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
RAD51抑制劑(RI-1)炭疽芽胞桿 2-巰基苯并噻唑
鮭色鎖擲酵母 吲唑
中慢生華癸根瘤 2-(4-叔丁基苯)-5-(4-聯(lián)苯基)-1,3,4-噁唑
白平195 苯并咪唑
干草鞘氨單胞 2-氨基苯并噻唑
洋蔥曲霉 2-氨基苯并咪唑
雜色曲霉 3-氨基-9-乙基咔唑
產(chǎn)氣莢膜梭 A型 鹽酸咪唑
釀酒酵母 咪唑
冷溫木克酵母 1,,4-雙(5-苯基-2-惡唑)苯
大腸埃希氏(大腸桿) 2,5-二苯惡唑
釀酒酵母 氧化金
厭糖鹽土生古 乙酸銀
秦氏蜜環(huán) 硫酸銀
卵孢白僵 化銀
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)