產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Syk抑制劑(GS-9973)
英文名稱:GS-9973
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:GS-9973 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg GS-9973是一種選擇性的Syk抑制劑,,IC50值為7.7nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1229208-44-9 別名:Entospletinib 純度:99.23% 分子量:411.46 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
啤酒神金黃桿菌葡萄糖合成2抗體Human THAP2 ELISA Kit大鼠磷蛋白關(guān)聯(lián)鞘糖脂微區(qū)1(PAG1)免疫試劑盒
盾殼霉谷草轉(zhuǎn)2抗體Human THG1L ELISA Kit大鼠淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌葡萄糖-6磷脫氫抗體Human THEM4 ELISA Kit大鼠淋巴功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)免疫試劑盒
黑曲霉葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5抗體Human THNSL2 ELISA Kit大鼠亮?;?LAP)免疫試劑盒
白僵菌葡萄糖合成1抗體Human THOC1 ELISA Kit大鼠粒巨噬集落激因子(GM-CSF)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Human TGIF2LX ELISA Kit大鼠粒集落激因子(G-CSF)免疫試劑盒
木賊鐮孢甘油激3抗體Human THOC2 ELISA Kit大鼠類固5α還原1(SRD5A1)免疫試劑盒
唾液乳桿菌高爾基體磷蛋白3樣蛋白抗體Human TGM4 ELISA Kit大鼠類風(fēng)濕因子(RF)免疫試劑盒
泡囊短波單胞菌磷化谷受體1抗體Human TFDP2 ELISA Kit大鼠酪羥化(TH)免疫試劑盒
康氏木霉G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human TFDP1 ELISA Kit大鼠酪蛋白激JAK3(Jak3)免疫試劑盒
pDC316磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1抗體Human SNX9(Sorting nexin-9) ELISA Kit大鼠克拉拉蛋白(CC16)免疫試劑盒
云芝磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1Human TFE3 ELISA Kit大鼠可溶性腫瘤壞死因子樣凋亡微弱誘導(dǎo)劑(sTWEAK)免疫試劑盒
灰樹花孔菌葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白抗體Human TFEB ELISA Kit大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)免疫試劑盒
土壤薄層菌GTP結(jié)合蛋白10抗體Human TFEC ELISA Kit大鼠可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)免疫試劑盒
總狀毛霉磷化Ras GTP活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體Human TFIP11 ELISA Kit大鼠可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)免疫試劑盒
Cerrena unicolorRas GTP活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體Human TFPT ELISA Kit大鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)免疫試劑盒
鮭色諾卡氏菌Nocardia│salmonicolor 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%(T)異蓮心堿
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%綿馬ABA
秦氏蜜環(huán)菌Armillaria│qinii H.C. Wang & J. Zhao 質(zhì)量規(guī)格:離子對色譜級大黃-8-β-D-吡喃葡萄糖苷
Syk抑制劑(GS-9973)香魏菇(側(cè)耳) 化銩(III) 六水合物γ氨基丁酸Elisa
雞腿菇(川雞3號) 5-羥基-2-甲基線粒體酮戊二酸脫氫Elisa
漆柄小孔 對三氟甲氧基苯肼鹽酸鹽NADH脫氫Elisa
釀酒酵母 磷酸磷脂AElisa
金色產(chǎn)色鏈霉 鄰乙二全酯Elisa
小單孢 烯酸異癸酯卵黃蛋白原受體Elisa
布氏正青霉 4-溴-3-氟苯煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸Elisa
香菇 4-溴-3-氟苯甲可溶性蛋白Elisa
靈芝 4-芐氧基-3-氟苯酸過氧化氫Elisa
蘇云金芽胞桿 6-乙酰基-2(3H)-苯并噻唑酮可溶性蛋白Elisa
銅生金球 分散橙37色氨酸羥化Elisa
枯草芽孢桿 (R)-(+)-3-(二甲氨基)吡咯烷乙酰Elisa
紫棕炭團(tuán) (S)-1-Boc-3-基吡咯烷6-磷酸葡萄糖脫氫Elisa
解淀粉芽孢桿 (R)-1-Boc-3-基吡咯烷ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Elisa
pET-44c 異烯溴化鎂一磷酸腺苷Elisa
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)