詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調控,;
⑤細胞分化及其調控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:MDM2抑制劑(SAR405838)
英文名稱:SAR405838
產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
SAR405838是一種高效的選擇性MDM2抑制劑,與MDM2結合,Ki值為0.88nM,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1303607-60-4 別名:MI-77301 純度:98.95% 分子量:562.5 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
香栓菌促甲狀腺釋放激Anti-H4C1 Antibody人PL7抗體/抗蘇酰tRNA合成(PL7)
耐久腸球菌Anti-HABP2 Antibody人PL7抗體/抗蘇酰tRNA合成(PL7)
豌豆根瘤菌甲狀腺T4偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-H4C1 Antibody人PL12抗體/抗酰tRNA合成(PL12/AlaRS)
雷蘑重組人腫瘤壞死因子Anti-H4C1 Antibody人PL12抗體/抗酰tRNA合成(PL12/AlaRS)
枇杷炭疽病菌端粒逆轉錄Anti-HAND1 Antibody人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)
大腸埃希菌抗菌肽Anti-HARS Antibody人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)
乳乳球菌乳亞種拓普西異構Ⅰ抗原Anti-HAND1 Antibody人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)
根瘤菌轉鐵蛋白Anti-HAT1 Antibody人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)
Marisediminicola色羥化(多肽)Anti-HAO1 Antibody人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)
長孢黃色鏈霉菌葡萄膜自身抗原UacaAnti-HAUS8 Antibody人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)
核盤菌黃熱病包膜糖蛋白Anti-HBP1 Antibody人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)
瓜枝孢(黃瓜黑星病菌)2,,4-二氧乙偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-HCCS Antibody人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)
繩狀曲霉抗尿激/血管升壓抗原(和肽)Anti-HAUSP(USP7) Antibody人抗DNAB抗體(anti-DNase B)
大腸埃希菌豬藍耳病病M蛋白Anti-HCAR3 Antibody人抗DNAB抗體(anti-DNase B)
蔗糖伯克霍爾德氏菌雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病)偶聯(lián)辣根過氧化物Anti-HCLS1 Antibody人抗BP180抗體(BP180-Ab)
醋化醋桿菌大鼠分泌型IgA(抗原)Anti-HCFC1 Antibody人抗BP180抗體(BP180-Ab)
細胞分化蛋白SEPT11抗體糙皮側耳,、平菇人外周血嗜堿性白血病細胞
晶狀體發(fā)育相關蛋白Six3抗體雪白根霉人肺癌細胞(干細胞庫保藏)
細胞分化蛋白SEPT14抗體爪哇根霉人侵襲性脈絡膜黑色瘤細胞
精結合蛋白2抗體戴爾根霉人膀胱癌細胞
MDM2抑制劑(SAR405838)鮑氏不動桿 硫代硫酸
大腸埃希氏 無水亞硫酸
雜色曲霉原變種 焦銻酸
盤長孢狀盤孢 磷酸三
小平菇(秀珍菇) 氟鋁酸
科恩根霉 碳酸氫
柱孢 硫酸鉻
化鉍
巨型艾耳球蟲 硫酸
普通變形 硫酸
肺炎克雷伯氏肺炎亞種
紅細屬 化
毛霉屬 結晶碳酸
球紅酵母 無水碳酸
雞白痢沙門氏 溴化