以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
LXS196是有效的和具有的蛋白激酶C(PKC)抑制劑,,目前在I期臨床試驗(yàn)中用于治療葡萄膜黑素瘤,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1874276-76-2 純度:99.25% 分子量:472.47 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水),。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
3) 收集細(xì)胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán),。
可溶性CD80(sCD80/B7-1)ELISA Kit英文名稱:sCD80/B7-1 ELISA Kitβ1,3半乳糖轉(zhuǎn)移3抗體包裝25g
可溶性CD80(sCD80)ELISA Kit英文名稱:sCD80 ELISA Kit紅陰離子交換蛋白1抗體包裝500g
巨細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit英文名稱:GM-CSF ELISA Kit腦特定蛋白Brn3B抗體包裝5g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA Kit英文名稱:MIP-1α/CCL3 ELISA KitBcl-2同源結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝100g
巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA Kit英文名稱:MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體包裝25g
巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)ELISA Kit英文名稱:MCP-1/CCL2 ELISA Kit腦和急性白血病胞漿蛋白抗體包裝5g
膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA Kit英文名稱:GDNF ELISA Kit骨髓基質(zhì)干抗原2抗體包裝25g
堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(FGF9)ELISA Kit英文名稱:FGF9 ELISA Kit組蛋白相關(guān)Bmi1抗體包裝5g
激活A(Activin A)ELISA Kit英文名稱:Activin A ELISA Kit癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體包裝100mg
活化A(Activin-A)ELISA Kit英文名稱:Activin-A ELISA Kit大腦富含鳥苷激相關(guān)蛋白抗體包裝5MG
核心蛋白聚糖(DCN)ELISA Kit英文名稱:DCN ELISA Kit腦富含膜附著信號(hào)蛋白1抗體包裝5g
肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(c-MET/HGFR)ELISA Kit英文名稱:c-MET/HGFR ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白3抗體包裝1g
分化簇抗原30配體(CD30L)ELISA Kit英文名稱:CD30L ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白抗體包裝5g
二肽基肽IV(DPP4/CD26)ELISA Kit英文名稱:DPP4/CD26 ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白4抗體包裝1g
二肽基肽4(DPP4/CD26)ELISA Kit英文名稱:DPP4/CD26 ELISA Kit炭疽桿菌菌體蛋白抗體包裝5g
磷化蛋白激B抗體干擾α2(IFNα2)Ki16198 is the methyl ester of Ki16425, which is a LPA antagonist and inhibits L
蛋白激酶C(PKC)抑制劑(LXS196)絲羧肽1抗體芹菜苷 APIIN(RG)Human, Mouse
神經(jīng)突觸前膜胞內(nèi)蛋白18抗體芹菜苷 APIIN(RG)Human
白介1受體相關(guān)蛋白抗體芹菜苷 APIIN(P)Human, Mouse, Rat
磷化蛋白酪磷2抗體芹菜苷 APIIN(P)Human, Rat
SYF2蛋白抗體化芹菜定 APIGENINIDIN CHLORIDE(P)Human
膽固酰轉(zhuǎn)移2抗體L-精-α-戊二鹽 ARGININE AKG(P)Human, Mouse
Saitohin蛋白抗體牛蒡子苷元 ARCTIGENIN(P)Human, Mouse
突觸結(jié)合蛋白1抗體牛蒡子苷元 ARCTIGENIN(P)Human, Mouse
磷化突觸結(jié)合蛋白1抗體牛蒡子苷 ARCTIIN(P)Human, Mouse, Rat