詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
4SC-202 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%,;優(yōu)質胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
4SC-202是特異的I型HDAC活性抑制劑(HDAC8除外),,對HDAC1,、2和3的IC50分別為1.2、1.12和0.57uM,,對IIa/IIb/III型HDAC的抑制性較弱,。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1186222-89-8 純度:98.81% 分子量:619.71 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水),。
2) 對于懸浮細胞,,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,,加入細胞培養(yǎng)液,,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,,500-1000g離心5min收集細胞,。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細胞,,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細胞,,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測),。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置,。結果可用CellQuest等軟件進行分析,,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,,PI為縱坐標,。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光,。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,,細胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán)。
魯毛霉Rhizobium leguminosarum大鼠B淋巴瘤因子2(Bcl-2)
淺黃曲霉Rhizobium lupini大鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)
香菇Rhizobium lupini大鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)
豇豆慢生根瘤菌Rhizobium mongolense大鼠中性粒彈性蛋白(NE)
薛瓦酵母Rhizobium mongolense大鼠中性粒彈性蛋白(NE)
大腸埃希菌Rhizobium mongolense大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子(TGSF)
卵孢木霉Rhizobium plateaum大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子(TGSF)
紅緣層孔菌Rhizobium rhizogenes大鼠羥脯(Hyp)
粘綠木霉Rhizobium sp.大鼠羥脯(Hyp)
豬苓Rhizobium tropici大鼠骨保護配體(OPGL)
釀酒酵母Pseudomonas aeruginosa大鼠骨保護配體(OPGL)
淡紫灰鏈霉菌Pseudomonas aeruginosa大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)
假單胞菌Pseudomonas aeruginosa大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)
聚生殼菌Pseudomonas aeruginosa大鼠抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)
瑞士乳桿菌Pseudomonas aeruginosa大鼠抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)
球孢白僵菌Pseudomonas aeruginosa大鼠鐵蛋白(FE)
b245輕鏈抗體嗜松青霉小鼠胚胎干細胞R1(干細胞庫保藏)
血小板源性生長因子AA+BB抗體串珠赤霉菌小鼠胚胎干細胞R1/E(干細胞庫保藏)
前列腺EP1受體抗體厚垣鐮孢菌人類胚胎干細胞HN4(干細胞庫保藏)
脯水解4抗體小環(huán)綿盤菌小鼠胚胎干細胞Nanog-GFP(干細胞庫保藏)
I型HDAC抑制劑(4SC-202)平常假絲酵母 聚酰
Pseudotripoconidium 鞣花酸
黃綠綠僵* 察氏瓊脂
瘡皰酸桿 聚酰
香菇屬 聚酰
短小芽孢桿 聚酰
食苯芽孢桿 聚酰
小單孢 銀椴苷
釀酒酵母 兩性電解質
紅酵母屬 產培養(yǎng)基
蠟樣芽孢桿 二十八烷
綠色木霉 兩性電解質
馬鏈球 兩性電解質
費氏中華根瘤 兩性電解質
植物乳桿 甲基辛弗林鹽酸鹽