公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CYP3A4/CYP24A1抑制劑(Ketoconazole)
英文名稱:Ketoconazole
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1g|5g
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Ketoconazole是咪唑類抗真菌劑,,是經(jīng)典的CYP3A4抑制劑,也是CYP24A1的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):65277-42-1 別名:(±)-Ketoconazol 純度:99.67% 分子量:531.43 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
紅景天(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: n-Amyl mercaptan巖藻糖變旋抗體包裝5g
紅景天苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: AmberliteIR-120X三體綜合征相關(guān)蛋白FUNDC1抗體包裝100g
紅景天,;草質(zhì)甙,;英文名稱: Amyl acetate弗林蛋白抗體包裝25g
紅芪(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Acetophenone富含絲/精重復(fù)結(jié)構(gòu)蛋白抗體包裝500g
紅曲(特殊發(fā)酵)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azobenzene巖藻糖基轉(zhuǎn)移6抗體包裝1g
葒草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Asbestos acid washed巖藻糖基轉(zhuǎn)移7抗體包裝5g
厚樸(厚樸)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Acenaphthene眼睛和頭發(fā)顏色相關(guān)蛋白FUZ抗體包裝10g
厚樸酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aluminum solution濾泡型轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗體包裝1g
厚樸總酚(對(duì)照品)英文名稱: Aluminum solution磷化堿性成纖維生長(zhǎng)因子受體1抗體包裝5g
胡薄荷;長(zhǎng)葉薄荷英文名稱: (±)-Catechin hydrateFAM65B蛋白抗體包裝25g
胡黃連(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Elaidic acid胞外分泌型絲/蘇蛋白激FAM20C抗體包裝5g
胡黃連苷 II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Heptadecanoic acid8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體包裝25g
胡黃連苷 III(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Heptadecanoic acid纖維母生長(zhǎng)因子受體底物3抗體包裝5g
胡黃連苷IV英文名稱: Leucomalachite Green纖維連接蛋白抗體包裝1g
胡黃連苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl ArachidateFCHO1蛋白抗體包裝25g
蘇云金芽孢桿菌日本亞種Bacillus│thuringiensis subsp. japanensis et al. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品溶血血小板活化因子試劑盒齊墩果;Oleanic acid
動(dòng)性微菌Planomicrobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,USP溶體相關(guān)膜蛋白2試劑盒芹菜;Apigenin
白靈菇Pleurotus│nebrodensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP溶菌試劑盒蒲公英甾醋酯;Taraxastery
CYP3A4/CYP24A1抑制劑(Ketoconazole)血小板因子4抗體芐西林/芐青霉(標(biāo)準(zhǔn)品) Zoledronic acid hydrate
血小板趨化因子7蛋白抗體芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Pamidronate Disodium
干擾誘導(dǎo)T趨化因子抗體丁三(標(biāo)準(zhǔn)品) Pamidronate Disodium
B-淋巴趨化因子抗體芬鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Gentamicin sulfate
凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體比林(標(biāo)準(zhǔn)品) Gentamicin sulfate
凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體己(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefuroxime Sodium
肌激M型抗體三乙(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefuroxime Sodium
NK受體BY55抗體(標(biāo)準(zhǔn)品) Ceftriaxone Sodium
CD229抗體環(huán)(標(biāo)準(zhǔn)品) Ceftriaxone Sodium