實驗流程:
1. 實驗前標準品,、試劑及樣本的準備,；
2. 加樣（標準品及樣本）100µL，37°C孵育1小時,；
3. 吸棄,，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時,；
4. 洗板3次,；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘,；
6. 洗板5次,；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL,，立即450nm讀數(shù),。

ELISA Kit檢測試劑盒優(yōu)點多，更加方便我們的科研學(xué)者進行科學(xué)實驗,，是科研實驗的好伙伴,。

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樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清等,。

（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
（6）組織標本
切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4）,，或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。
注意事項：
1.加樣：
①實驗樣本過多時,，可分批次操作,，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后,，用吸水紙吸干孔外試劑,；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑,，并經(jīng)常校正其準確性,，此外，要做到一份樣本一個移液頭,，防止交叉污染,。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應(yīng)時間的條件,；
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,，因此盡量采用水浴,；
3.洗板：
①手工洗板時,，拍板時要垂直，避免交叉污染,，用力不能過猛,，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出,；
③為了洗滌效果好,，實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,，或適當增加洗板的次數(shù),；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液,；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑,。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min,。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光,。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm,；定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,，酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進行測試,。

綿羊激肽原1(KNG1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

綿羊死亡相關(guān)蛋白6(DAP6)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

綿羊心肌營養(yǎng)素1(CT-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

綿羊BCL2修飾因子(BMF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

綿羊腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G1(ABCG1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

綿羊酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

綿羊N端外顯肽(Ext-N)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

綿羊免疫球蛋白E Fc段受體II(FcεR II)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

綿羊髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

綿羊孕烷受體(PXR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

綿羊膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(SREBP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

綿羊生長抑素(SST)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

綿羊白介素2受體β(IL-2Rβ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

綿羊蛋白酪氨酸磷酸酶受體K(PTPRK)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

DiphtheriaAb白喉抗體ELISA KitFGF9  堿性成纖維細胞生因子9抗體 規(guī)格: 0.2ml

Cystatin A  胱抑素A/半胱氨酸蛋白酶抑制劑A抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Gold  膠體金標記的兔抗人IgG F(ab')2  規(guī)格: 0.5ml

Oxytocin R  催產(chǎn)素受體(宮素受體)抗體 規(guī)格: 0.1ml

His tag(2D5)  小鼠抗聚組氨酸單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml

RIPK-1/RIP  絲氨酸蘇氨酸激酶1受體相互作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Glycophorin C/CD236  糖蛋白C抗體 規(guī)格: 0.1mlTNFC/lymphotoxin Beta  瘤壞死因子C/淋巴毒素β抗體 規(guī)格: 0.2ml

ECRG4/C2orf40  食道相關(guān)基因4蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlSPRR1a/Cornifin A  角質(zhì)蛋白α抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-RGS19(Ser24)  磷酸化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 規(guī)格: 0.1mlLIR-8/CD85c/LILRB5  白細胞免疫球蛋白樣受體8抗體 規(guī)格: 0.2ml

XRCC4  X射線修復(fù)交叉互補蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2mlMAGEA12  黑色素瘤相關(guān)抗原12抗體 規(guī)格: 0.2ml

PCNA-Proliferation Marker  增細胞核抗原抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgG/Bio  生物素標記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml

ING1/p33  生抑制因子基因1抗體 規(guī)格: 0.1mlGFAP delta  膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAPδ抗體 規(guī)格: 0.2ml

GRK5  G蛋白偶聯(lián)受體激酶5抗體 規(guī)格: 0.2mlCXCL7/NAP-2/PPBP  小板趨化因子7蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

BRCAA1/RBBP1L1  相關(guān)抗原BRCAA1抗體 規(guī)格: 0.2mlCGP-39/YKL-40  軟骨糖蛋白39抗體 規(guī)格: 0.1ml

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。*，酶是一種有機催化劑,，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔,、標準孔,、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11. 測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。