商品介紹:
Dolutegravir鈉鹽是HIV蛋白酶強效抑制劑,,IC50值為2.7nM,,對Raltegravir耐藥突變型HIV毒株Y143R,Q148K,N155H,和G140S/Q148H也有一定的抑制作用,。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1051375-19-9 別名:GSK-1349572A 純度:97.02% 分子量:441.36 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水),。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞,。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,,加入細胞培養(yǎng)液,,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細胞,。
3) 收集細胞后,,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細胞,,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測),。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,,PI為縱坐標,。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光,。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞,,細胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
補骨脂定(標準品)英文名稱: Dexmedetomidine HClIQCC蛋白抗體包裝25g
補骨脂二氫黃;補骨脂(標準品)英文名稱: DeflazacortIQCA1蛋白抗體包裝500g
補骨脂二氫黃(標準品)英文名稱: D-(-)-Pantolactone集成復雜蛋白亞單位3抗體包裝5g
補骨脂酚(標準品)英文名稱: Buflomedil HCl干擾alpha 14蛋白抗體包裝100g
補骨脂寧;補骨脂異黃(標準品)英文名稱: Buflomedil HCl白介6抗體包裝25g
補骨脂(標準品)英文名稱: 4-Androstene-3,17-dione白介-10抗體包裝5g
布渣葉(標準品)英文名稱: 4-Androstene-3,17-dione白介6抗體包裝25ml
菜油甾英文名稱: Lucidenic acid A磷化內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導蛋白a1抗體包裝5ml
參麥提取物(標準品)英文名稱: Vitamin E succinate白介28受體抗體包裝1g
蠶沙(標準品)英文名稱: Ixabepilone (Azaepothilone B; BMS 247550)KB抑制蛋白激Ζ抗體包裝25g
蒼耳亭(標準品)英文名稱: 5-methylcytosine胰島基因增強結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
蒼耳子(標準品)英文名稱: 7-Ethylcamptothecin整合β1結(jié)合蛋白2抗體包裝1g
蒼術(shù)(茅蒼術(shù))(標準品)英文名稱: 7-Ethylcamptothecin線粒體翻譯起始因子3抗體包裝1g
蒼術(shù)苷A英文名稱: (-)-Blebbistatin白介27β抗體包裝250mg
蒼術(shù)(標準品)英文名稱: Nedaplatin胰島樣生長因子1受體抗體包裝5g
佛羅里達側(cè)耳Pleurotus│florida 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR空腸彎曲菌試劑盒湖貝堿 ;peimine
煙色擬盤多毛孢Pestalotiopsis│adusta 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品空腸彎曲菌試劑盒黑芥子苷;Sinigrin
根瘤菌(檉麻)Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR克雷白氏桿菌試劑盒黃連堿;Coptisine chlori
HIV蛋白酶抑制劑(Dolutegravir sodium)硬脂鈉
月桂磺鈉
藻膠鈉
正釩鈉
正辛鈉
仲過鈉
重碳鈉
紫堇二鈉
D-葡萄糖