H+/K+-ATPase抑制劑(AZD0865)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-SHP2/PTPN11/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ILK-1 (Integrin-linked protein kinase 1) 整合素連接激酶-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
P物質(zhì)受體抗體 Ant

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）,。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。
大豆慢生根瘤菌Bacillus thuringiensis魚類促性腺激釋放激

釀酒酵母Bacillus thuringiensis魚類狀腺原(T3)

黃桿菌Bacillus thuringiensis魚類狀腺原(T3)

中慢生華癸根瘤菌Bacillus thuringiensis魚類皮質(zhì)(Cortisol)

豬丹絲菌Bacillus thuringiensis魚類皮質(zhì)(Cortisol)

球黑孢菌Bacillus thuringiensis魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)

馬戍鏈霉菌Bacillus thuringiensis魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)

酵母屬Bacillus thuringiensis魚骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)

鏈霉菌Bacillus thuringiensis魚骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)

紫芝Bacillus thuringiensis紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白(Lv/Vn)

Bacillus thuringiensis紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白(Lv/Vn)

 Pseudofusicoccum stromaticumBacillus thuringiensis羅氏沼蝦諾達(dá)病(MrNV)

平菇Bacillus thuringiensis羅氏沼蝦諾達(dá)病(MrNV)

弗雷德里克斯堡假單胞菌Bacillus thuringiensis蛇因子(CVF)

栗疫菌Bacillus thuringiensis蛇因子(CVF)

草木樨中華根瘤菌Bacillus thuringiensis牛蛙生長(zhǎng)激（GH）

磷化神經(jīng)纖毛蛋白1抗體膝曲彎孢格氏嗜鹽堿桿菌

磷化中心粒蛋白Nudel抗體稻梨孢（稻瘟病菌）綠木霉

磷化細(xì)胞核因子抗體稻梨孢（稻瘟病菌）（不提供）普通變形菌（暫無(wú)）

磷化谷受體2A+2B抗體熱帶金孢中華被毛孢
H+/K+-ATPase抑制劑(AZD0865)SCN4B 英文名稱： 鈉通道亞基β4抗體 0.2ml

Ephrin B3 英文名稱： 酪酸蛋白激酶B3抗體 0.2ml

Trop-2抗體 Anti-Trop-2 0.1ml

Anti-TREM2/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Ser302) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 規(guī)格 0.1ml

Secretin 分泌素(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg