商品介紹:
MS436是一種bromodomain抑制劑,,有效作用于BRD4BrD1,Ki為30-50nM,比作用于BrD2選擇性高10倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1395084-25-9 純度:98.02% 分子量:383.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,,將細(xì)胞輕輕吹打下來,,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
3) 收集細(xì)胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
嘴突凸臍蠕孢人內(nèi)Anti-ZNF18 Antibody小鼠小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)
李克犁頭霉人過氧化物體增殖因子活化受體γAnti-ZNF227 Antibody小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)
麗鹽單胞菌人環(huán)孢AAnti-ZNF232 Antibody小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)
大豆慢生根瘤菌人神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白Anti-ZNF23 Antibody小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)
天藍(lán)色鏈霉菌人15脂加氧Anti-ZNF280A Antibody小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)
米曲霉人膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白Anti-ZNF24 Antibody小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)
康寧木霉人白三烯C4Anti-ZNF280C Antibody小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)
人色CAnti-ZNF292 Antibody小鼠少突膠質(zhì)髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)
秦氏蜜環(huán)菌人脂蛋白脂Anti-ZNF329 Antibody小鼠少突膠質(zhì)髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)
豬布魯氏菌人糖原磷化同工IIAnti-ZNF287 Antibody小鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B)
釀酒酵母人糖原磷化同工MMAnti-ZNF337 Antibody小鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B)
釀酒酵母人糖原磷化同工BBAnti-ZNF384 Antibody小鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP)
Enterococcus faecium人脂蛋白αAnti-ZNF420 Antibody小鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP)
黃曲霉人骨膠原交聯(lián)Anti-ZNF397 Antibody小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)
白蠟多年臥孔菌人Ⅰ型前膠原C末端肽Anti-ZNF446 Antibody小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)
東方異擔(dān)子菌人脫氧吡啶/脫氧吡啶啉Anti-ZNF420 Antibody小鼠磷脂酰絲(PS)
氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP合成A1抗體粉肉色杯傘黑腹果蠅胚胎細(xì)胞
基丁轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VGAT抗體楊鏈格孢人表皮角質(zhì)細(xì)胞
線粒體外膜孔蛋白3抗體電壓依賴陰離子通道蛋白3穎苞莖點(diǎn)霉人腎小球系膜細(xì)胞
魚,、青鳉魚卵黃蛋白原抗體馬勃狀硬皮馬勃猴腎細(xì)胞
bromodomain抑制劑(MS436)紅紫青霉 磺酰羅丹明B
櫟 番紅花紅
新孢青霉 麗絲羅丹明B
杰氏假單胞 日落黃
鏈格孢 蘋果專化型 紅
香栓孔 酒石黃
蠟狀芽孢桿 硫堇
紅球?qū)?/span> 偶氮胭脂紅G
假單胞屬 偶氮胭脂紅B
毛頭鬼傘 α-萘苯甲
藍(lán)色犁頭霉 1-苯基-3-吡唑烷酮
釀酒酵母 1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮
芽孢桿 1-苯基-3-甲基-4-苯甲?;吝蜻?/span>
芽枝狀枝孢 苯芴酮
泡囊側(cè)耳(鮑魚菇) 米氏酮