商品介紹:
TG101209是一種選擇性的,,有效的JAK2抑制劑,,IC50值為6nM,;同時(shí)能抑制Flt3,,RET和BRD4的活性,,IC50值分別為25nM,,17nM和130nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):936091-14-4 純度:98.94% 分子量:509.67 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JAK2抑制劑(TG101209)
英文名稱:TG101209
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
醋化醋桿菌人環(huán)磷酰Anti-ZFPM2 Antibody小鼠IgM
孟氏假單胞菌人1,3-二磷甘油Anti-ZFP91 Antibody小鼠乳脫氫(LDH)
植物乳桿菌人1,5-脫水葡萄糖/1,5-脫水山梨Anti-ZFP42 Antibody小鼠乳脫氫(LDH)
克羅諾桿菌屬人β羥丁Anti-ZKSCAN5 Antibody小鼠抗紅抗體(RBC)
銀色鏈霉菌人高密度脂蛋白膽固Anti-ZIC1 Antibody小鼠抗紅抗體(RBC)
枯斑擬盤多毛孢人N端中段骨鈣Anti-ZMYM4 Antibody小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)
土曲霉人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6Anti-ZMYND11 Antibody小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)
藤黃微球菌人低密度脂蛋白受體Anti-ZKSCAN4 Antibody小鼠CD19分子(CD19)
耐寒短桿菌人低密度脂蛋白受體Anti-ZMYND11 Antibody小鼠CD19分子(CD19)
枯草芽孢桿菌人高密度脂蛋白Anti-ZNF106 Antibody小鼠CD3分子(CD3)
蘭小菇人αS轉(zhuǎn)移Anti-ZMYND8 Antibody小鼠CD3分子(CD3)
腸膜明串珠菌人過(guò)氧化物Anti-ZNF106 Antibody小鼠小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)
枯草芽孢桿菌人同型半胱Anti-ZNF134 Antibody小鼠小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)
毛柄金錢菌(金針菇)人游離脂肪Anti-ZNF148 Antibody小鼠小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)
松口蘑人骨粘連蛋白Anti-ZNF225 Antibody小鼠小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)
耐熱芽胞芽胞桿菌人葉Anti-ZNF174 Antibody小鼠小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)
突觸小泡膜蛋白同源樣蛋白1抗體淡紫擬青霉菌綿羊前體脂肪細(xì)胞
腦特異性鈉依賴無(wú)機(jī)磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體褐栗孔菌小鼠腎小管上皮細(xì)胞
腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體瓦尼針層孔菌豬腎傳代細(xì)胞
視覺(jué)抑制蛋白抗體細(xì)褐鱗蘑菇人外周淋巴細(xì)胞
JAK2抑制劑(TG101209)釀酒酵母 磷鎢酸
芽孢桿 7-甲氧基
耐久腸球 磷鉬酸
香菇 枸櫞酸血根堿
釀酒酵母 鋅試劑
燦爛類芽胞桿 甲基丁香
大腸埃希氏 熒光桃紅B
分枝節(jié)桿 二甲基黃
孟氏假單胞 4-羥基偶氮苯
巨型艾耳球蟲(chóng) 2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二乙氨基)
粉紫香蘑 葉綠AB混合物
谷棒桿 葉綠AB混合物
枯草芽孢桿 普魯士藍(lán)
弗雷德里克斯堡假單胞 茜藍(lán)S
釀酒酵母 依來(lái)鉻藍(lán)R